詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:組蛋白甲基轉移酶DOT1L抑制劑
英文名稱:SGC0946
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
SGC0946是組蛋白甲基轉移酶DOT1L高效選擇性抑制劑,IC50值為0.3nM,有效抑制混合系白血病細胞。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1561178-17-3 純度:98.48% 分子量:618.57 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
孟氏假單胞菌端粒逆轉錄抗體Anti-HMGN2 Antibody微管蛋白β6(TUBβ6)
大腸埃希菌甲狀腺激反應蛋白抗體Anti-HMGB4 Antibody微管蛋白β4(TUBβ4)
雞傷寒沙門氏菌跨膜蛋白49抗體Anti-HMOX1 Antibody微管蛋白β3(TUBβ3)
微小桿菌腫瘤蛋白D54蛋白抗體Anti-HMMR Antibody微管蛋白β1(TUBβ1)
串珠鐮孢四環抗體Anti-HMOX1 Antibody(PB0212)微管蛋白β(TUBβ)
交替紅色桿菌屬腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體Anti-HNF1A Antibody微管蛋白α8(TUBα8)
矮被孢霉踝蛋白抗體Anti-HMOX2 Antibody(PB0213)網狀蛋白4受體(RTN4R)
金耳磷化踝蛋白抗體Anti-HMOX1(HO-1) Antibody網狀蛋白4(RTN4)
釀酒酵母驅動蛋白結合蛋白1抗體Anti-HNRNPD Antibody網狀蛋白3(RTN3)
豇豆慢生根瘤菌瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體Anti-HNF1B Antibody網狀蛋白2(RTN2)
藤倉鐮孢磷化微管相關蛋白抗體Anti-HNRNPA1 Antibody網狀蛋白1(RTN1)
布魯氏菌 生物Ⅱ型四分子交聯體5抗體Anti-HNRNPA2B1 Antibody網格蛋白交互子1(CLINT1)
盤長孢狀盤孢熱休克蛋白75抗體Anti-HNF4A Antibody(PB0211)網鈣蛋白3(RCN3)
副豬嗜血桿菌腫瘤血管內皮標志物8抗體Anti-HNRNPF Antibody網鈣蛋白2(RCN2)
粉紅單端孢霉四分子交聯體15抗體(四旋蛋白)Anti-HNRNPH1 Antibody網鈣蛋白1(RCN1)
Oerskovia enterophila腱調蛋白抗體(軟骨調節樣1蛋白)Anti-HO-2(HMOX2) Antibody網蛋白(PLEC)
神經細胞囊泡循環蛋白1抗體葡枝根霉人腦動脈血管內皮細胞
多配體聚糖結合蛋白1抗體乳乳球菌人小腦顆粒細胞
磷肌磷蛋白INPP5G抗體產短桿菌人神經小膠質細胞
磷肌磷蛋白INPP5H抗體沙雷氏菌屬人脈絡膜血管內皮細胞
組蛋白甲基轉移酶DOT1L抑制劑豬鏈球 六價鉻/Cr(Ⅵ)過氧化物Elisa
白僵 2--3,5-二硝基三氟甲苯葡萄糖苷Elisa
栗疫病 鉻/Cr5脂加氧Elisa
細交鏈孢霉 鈷/Co5脂加氧Elisa
發酵成對桿 脫氧熊果苷半胱氨酸蛋白9Elisa
解脂假絲酵母 L-抗壞血酸-2-磷酸酯鎂色CElisa
麥根腐平臍蠕孢 鎘/Cd分泌型球蛋白GElisa
類馬鏈球 大茴香油顆粒BElisa
副豬嗜血桿 柚皮苷二氫查爾酮穿孔;成孔蛋白Elisa
枯草芽孢桿 甘草酸輸血傳播病Elisa
黏液桿 托吡酯胰島生長因子1Elisa
蒼黃鏈霉 愈創奧肌苷酸Elisa
禽腺病Ⅰ型 鈣/Ca酮戊二酸脫氫復合體Elisa
野尻鏈霉 鉍/Bi檸檬酸合Elisa
球色單隔孢屬 羥基瓜爾膠異檸檬酸脫氫Elisa