瑞氏染色液(Wright stain,即用型)公司正在出售的產(chǎn)品：HIV gp120/FITC 熒光標(biāo)記艾滋病病抗體IgG溴百里香酚藍(lán) ACS, Dye content 95 %
HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 熒光標(biāo)記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG溴百里香酚藍(lán)指示劑
HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 熒光標(biāo)記艾滋病病-1包膜糖蛋白

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

英文名稱： 7,4'-DIHYDROXYFLAVONE激活激PAK7抗體包裝100g

奧卡西平英文名稱： Euphorbiasteroid孕激誘導(dǎo)阻斷因子抗體包裝500g

奧拉西坦英文名稱： heteroclitin D增殖核抗原抗體包裝1g

奧美拉唑英文名稱： (-)-PERILLALDEHYDE增殖核抗原抗體包裝25g

奧沙拉秦鈉英文名稱： L-ABRINEpiwi樣1蛋白抗體包裝5g

巴芬英文名稱： Physalin L血小板源性生長因子A抗體包裝25g

保泰松英文名稱： 1-METHYLHYDANTOIN泌乳抗體包裝5g

保泰松鈣英文名稱： Columbin血小板源性生長因子-B抗體包裝1g

保泰松鈉英文名稱： Anwuligan血小板源性生長因子受體A抗體(PDGFRα)包裝5g

保特佐米蒎烷二酯英文名稱： tracheloside血小板源性生長因子受體B抗體(PDGFRβ)包裝250g

倍他米松環(huán)氧物英文名稱： chikusetsu saponin Iva脫氫激4抗體包裝50g

磺貝托司汀英文名稱： 3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl色上皮源性因子抗體包裝1g

利扎曲普坦;利扎曲坦英文名稱： dendrophenol肝癌高表達(dá)基因抗體包裝25g

唑啉鹽鹽/鹽妥拉唑林英文名稱： ABSINTHIN腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝5g

妥英鈉英文名稱： α-hederin腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝100g

草本枝孢Cladosporium│herbarum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR肌紅蛋白試劑盒白術(shù)內(nèi)酯III;Atractylenol

ATCC43538=JCM3354=BCRC13417=HUT6552=IFO1資源名稱: 云南游動(dòng)放線菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品肌酐試劑盒白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ;Atractylenolid

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR饑餓激試劑盒白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ;Atractylenolid
瑞氏染色液(Wright stain,即用型)薄黑孔 2-溴-1-（3-）乙酮谷氨酸脫羧65Elisa

釀酒酵母 2,3-二甲氧基苯酸谷氨酸脫羧67Elisa

釀酒酵母 3,5,6-三水楊酸多巴D2受體Elisa

平菇 3--2-丁酮tcf-4抗體Elisa

繩狀青霉 二氟草酸酸鋰谷氨酰酰肽環(huán)轉(zhuǎn)移Elisa

淺黃隱球酵母 4-溴-3-鹽酸鹽蛋白質(zhì)氧化羰基化Elisa

居真細(xì) 3-基-4-氟三氟甲苯泰澤病原體抗體Elisa

燼灰產(chǎn)色鏈霉 N-乙基-2-甲基弓形蟲抗體Elisa

叢毛單胞 化N-辛基吡啶SYA674型四環(huán)Elisa

中國臺(tái)灣根霉 (S)-(-)-alpha-(Boc-氨基)-gamma-丁酸內(nèi)酯球蛋白G3亞型抗體Elisa

密歇根棍狀桿標(biāo)記亞種 磷酸哌喹甲型肝炎病抗體Elisa

大腸埃希 4-溴-3-氟苯甲音猬因子Elisa

板栗蛇孢日規(guī)殼 2-甲氧基吡啶-4-酸頻哪酯谷氨酰Elisa

間型假絲酵母 4-甲基-5-羥基呋喃-2-酮磷酸肌3激Elisa

擴(kuò)展青霉改名婁地青霉 5-甲基四氮唑Dectin-1蛋白Elisa