產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Pim1/AKK1/MST2/LKB1抑制劑
英文名稱:Pim1/AKK1-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Pim1/AKK1-IN-1是一種有效的多種酶抑制劑,能夠作用于Pim1/AKK1/MST2/LKB1,Kd值分別為35nM/53nM/75nM/380nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1093222-27-5 別名:LKB1/AAK1 dual inhibitor 純度:98.10% 分子量:339.35 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
啤酒神金黃桿菌基質(zhì)金屬蛋白2抗體Human MCUR1 ELISA Kit硫皮膚(DS)
卷枝毛霉灰藍(lán)變型基質(zhì)金屬蛋白3抗體Human SLIT2(Slit homolog 2 protein) ELISA Kit硫腦苷酯(SFT)
微枝形桿菌基質(zhì)金屬蛋白-7抗體Human MCCC1 ELISA Kit硫類肝(HS/HPS)
糙梗青霉基質(zhì)金屬蛋白-9抗體Human MDC1 ELISA Kit硫類肝(HS)
淺白隱球酵母髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體Human MCCC2 ELISA Kit硫角質(zhì)(KS)
釀酒酵母多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體Human BID(BH3-interacting domain death agonist) ELISA Kit硫雌(E1S)
白藍(lán)放線菌多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體Human PGA3(Pepsin A) ELISA Kit硫嘌呤S-甲基轉(zhuǎn)換(TPMT)
根瘤菌多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體Human Smad7/MADH7(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit硫化氫(H2S)
堅強(qiáng)芽孢桿菌線粒體核糖體蛋白L28抗體Human TNFAIP6(Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein) ELISA Kit鱗狀癌相關(guān)抗原(SCCAg)
Mucilaginibacter sp.錯配修復(fù)蛋白2抗體Human ABP1(Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]) ELISA Kit鱗狀癌抗原1(SCCAg1)
大腸埃希菌5甲基胞嘧啶抗體Human MAOA(Amine oxidase [flavin-containing] A) ELISA Kit鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)
米曲霉T淋巴分化蛋白MAL2抗體Human GCK(Glucokinase) ELISA Kit磷酯酰肌特異性磷酯C(PIPLC)
普通變形菌環(huán)指蛋白61抗體Human CTXI(Cross Linked C-opeptide of Type I Collagen) ELISA Kit磷酯Cγ鏈(PLCγ1)
異配囊接霉蕈堿型乙酰受體M3抗體Human ITGA2B(Integrin alpha-IIb) ELISA Kit磷酯C(PLC)
香菇錯配修復(fù)蛋白1抗體Human ANGPT4(Angiopoietin-4) ELISA Kit磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)
頭孢霉血管緊張Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體Human ITGA2B(Integrin alpha-IIb) ELISA Kit磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s辛弗林
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)Dictyophora│sajor-caju 質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR熊果苷
Pim1/AKK1/MST2/LKB1抑制劑淺絳紅鏈霉 4--3,5-二硝基三氟甲苯CD4分子Elisa
節(jié)桿屬 2-氟-3-吡啶羧酸CD8分子Elisa
釀酒酵母 鄰氟苯甲酰神經(jīng)營養(yǎng)因子3Elisa
平菇 4-硝基-3-三氟乙酰轉(zhuǎn)移Elisa
釀酒酵母 2-溴三氟甲苯γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽Elisa
放射形根瘤 2-氨基-5-苯甲脫氧吡啶酚;脫氧吡啶啉Elisa
炭疽芽孢桿 (-)-10-樟腦磺酰5α還原Elisa
玉米黑粉 異煙酰鹽酸鹽狂犬病糖蛋白Elisa
大腸埃希氏 4-氟吡啶鹽酸鹽狂犬核蛋白Elisa
浸麻類芽孢桿 2-叔丁酯尿蛋白Elisa
泡盛曲霉 反-2-癸烯蛋白激AElisa
畢赤酵母 2-噻吩乙酰半乳糖凝集3Elisa
枯草芽孢桿 2-酸賴氨酰氧化樣蛋白2Elisa
李色鏈霉 甲氧基乙酰幾丁質(zhì)Elisa
根瘤屬 5-氟-8-羥基喹啉凝血因子XIIaElisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)