Caspase 3抑制劑Ac-DEVD-CHO(10mM)公司*的產(chǎn)品：PTEN/MMAC1 /FITC 熒光標(biāo)記一種腫瘤抑制因抗體（C端）IgGL-天冬氨1-芐酯 98%
Phospho-PTEN (Ser380) /FITC 熒光標(biāo)記化腫瘤抑制因PTEN抗體IgGL-天門冬氨 1-酯 98%
Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383)/FITC 熒光標(biāo)記

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Caspase 3抑制劑Ac-DEVD-CHO(10mM)

英文名稱：Ac-DEVD-CHO

產(chǎn)品規(guī)格：100μl

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

暹羅盤孢冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體Human ENTPD4 ELISA Kit兔子Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

產(chǎn)朊假絲酵母連接相關(guān)蛋白1抗體Human ENOX2 ELISA Kit兔子Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒

費(fèi)希爾曲霉連接相關(guān)蛋白2抗體Human ENOX1 ELISA Kit兔子Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒

成鏈需鹽桿菌 磷化周期依賴性激5抗體Human ENPP4 ELISA Kit兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒

pACYC184異戊烯半胱羧基轉(zhuǎn)移抗體Human ENPP5 ELISA Kit兔子Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒

黃桿菌鳥嘌呤核苷交換因子CLLD7抗體Human ELP4 ELISA Kit兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒

四川散斑殼趨化樣因子超家族成員4抗體Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔子Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6)免疫試劑盒

繩索狀芽胞桿菌趨化樣因子超家族成員7抗體Human EIF5B ELISA Kit兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒

膠孢趨化樣因子超家族成員5抗體Human EMB ELISA Kit兔子Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64B抗體Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔子Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)免疫試劑盒

釀酒酵母組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移抗體Human ELMOD1 ELISA Kit兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌趨化樣因子超家族成員6抗體Human ELMOD2 ELISA Kit兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFB3)免疫試劑盒

熱帶假絲酵母cornichon樣蛋白抗體Human EIF5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A-1) ELISA Kit兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒

溜曲霉Ras激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白1抗體Human EIF5 ELISA Kit兔中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒

棲藻海桿狀菌Ras激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白2抗體Human ELOF1 ELISA Kit兔脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒

西蕃蓮莖基腐病Ras激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體Human EMB ELISA Kit兔載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>50%,BSSpondin-2 毛萼結(jié)

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2試劑盒莫諾宗

郎伍德鏈霉菌Streptomyces│longwoodensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白1試劑盒貓眼草黃
Caspase 3抑制劑Ac-DEVD-CHO(10mM)微白黃鏈霉 2-甲硫基-4--5-溴嘧啶過氧化物體增殖物激活受體αElisa

細(xì)鏈格孢 (S)-4'-(2-甲基丁基)-4-聯(lián)苯過氧化物體增殖物激活受體βElisa

米根霉 2,3-二氟苯酸過氧化物體增殖物激活受體γElisa

三棱孢小囊 鹽酸肌氨酸過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1αElisa

沙福芽孢桿 4-羥基苯硫酚過氧化物氧化還原6Elisa

粘質(zhì)皮狀新絲孢酵母 2,5-二甲氧基苯酸過氧化脂質(zhì);乳過氧化物Elisa

熒光假單胞 2-氟-5-酚過氧亞硝基陰離子Elisa

枯草芽孢桿 三乙鹽酸鹽還原型Elisa

泡盛曲霉 4-環(huán)己苯和肽Elisa

灰銹赤鏈霉 3,5-二酸核糖體S6K蛋白激Elisa

釀酒酵母 3,4-二乙酮核因子E2相關(guān)因子2Elisa

野別樣希瓦氏 2,5-二酸核因子κBElisa

科貝特氏屬 4-肼鹽酸鹽核因子κB受體活化因子Elisa

紅色紅菇 2,3-二酸核因子κB受體活化因子配基Elisa

青紫鏈霉 3-肼鹽酸鹽核因子κB抑制蛋白αElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)