液泡V-ATP酶抑制劑(Bafilomycin A1)公司*的產品：Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4) Smad4抗原4,4,4-三氟巴豆酯 98%
Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7) Smad 7(多肽)3-氨-4,4,4-三氟酯 97%
phosphor-SMA

產品屬性：

中文名稱：液泡V-ATP酶抑制劑(Bafilomycin A1)

英文名稱：Bafilomycin A1

產品規格：1mL(10mM)|100ug|1mg|5mg

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 

意大利青霉Penicillium│italicum 質量規格：0.99洋川芎內酯I

聚團拉布倫茨氏菌Labrenzia│aggregata 質量規格：光譜純SP洋川芎內酯H

杉葉散斑殼Lophodermium│uncinatum Darker 質量規格：0.9洋川芎內酯A
液泡V-ATP酶抑制劑(Bafilomycin A1)黑附球 Ru(bpy)2(mcbpy-O-Su-ester)(PF6)2γ-氨基丁酸轉氨Elisa

雙孢蘑菇 N-芐基-2-萘γ-氨基丁酸轉氨Elisa

瓊氏不動桿 2',6'-二氟苯乙酮乙酰轉移Elisa

多主葡萄殼 2,7-二溴咔唑肉堿棕櫚酰轉移Elisa

根瘤 2,4-二氟苯磺酰檸檬酸合成Elisa

豌豆根瘤 Fmoc-3-硝基-L-酪氨酸卵黃蛋白Elisa

淀粉鏈霉 N-[芴甲氧羰基]-D-色氨酸五氟甲基酯漆Elisa

褐色馬勃 2,3,6-三氟苯甲單酚氧化Elisa

黃棕鏈霉 4-羧基-3-苯酸雙酚氧化Elisa

Lasiodiplodia rubropurpurea Abacavir血凝;凝集Elisa

束叢鏈霉 2,6-二氟吡啶-3-酸糖基轉移Elisa

深粘紅酵母 N-叔丁基-十氫異喹啉-3(S)-甲酰尿苷二磷酸葡萄糖酸轉移Elisa

達格斯坦鏈霉 1-溴-2-氟-4-苯原癌基因c-Met蛋白Elisa

玉蕈（真姬菇） 鹽酸度洛可溶性糖Elisa

煙管 4-溴-3-過氧化Elisa 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)