人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；RKO-E6傳代方法培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；RKO-E6傳代方法冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  RKO-E6細(xì)胞系是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。 該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動子的人乳狀病毒（HPV）E6癌基因。 RKO-E6細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

虎皮香菇，漏斗香菇 Lentinus tigrinus

人胃腺細(xì)胞英文名稱：AGS

MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

C4-2(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

爪哇根霉 Rhizopus javanicus

假單胞菌 Pseudomonas sp.

CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

鏈霉菌 Streptomyces sp.

VE(人血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum

BEL-7404(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

雪白根霉 Rhizopus niveus

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

Protein G Affinity MagBeads/Protein G 磁性親和純化介質(zhì)0.5ml國產(chǎn)gersion

暫無 Eupenicillium sp.

黑木耳 Auricularia auricula

中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

小鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii DC4 （50 mg）1，4-bis[4-[（2，5-dioxo-1-pyrrolidinyl）oxy]-4-oxobutyl]-1，4-diazoniabicyclo[2。2。2]octane， dibromide； DC4

15（R）-HEDE （100 ug）15R-hydroxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（R）-HEDE

Methylone （hydrochloride） （exempt preparation） （1 mg）3,4-Methylenedioxy-N-methylcathinone|M1|bk-MDMA； 1-（1,3-benzodioxol-5-yl）-2-（methylamino）-1-propanone, monohydrochloride

MDDMA （hydrochloride） （5 mg）N,N,α-trimethyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine, monohydrochloride

Atractyloside （potassium salt） （500 ug）（2β）-15α-hydroxy-2-[[2-O-（3-methyl-1-oxobutyl）-3,4-di-O-sulfo-β-D-glucopyranosyl]oxy]-19-norkaur-16-en-18-oic acid, dipotassium salt

4-Fluorobuphedrone （hydrochloride） （5 mg）4-FBP； 1-（4-fluorophenyl）-2-（methylamino）butan-1-one, monohydrochloride

Ginsenoside Rd （10 mg）20-（β-D-glucopyranosyloxy）-12β-hydroxydammar-24-en-3β-yl 2-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranoside

AZD 5363 （25 mg）4-amino-N-[（1S）-1-（4-chlorophenyl）-3-hydroxypropyl]-1-（7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl）-4-piperidinecarboxamide

W-18 （10 mg）4-chloro-N-[1-[2-（4-nitrophenyl）ethyl]-2-piperidinylidene]-benzenesulfonamide

AG-538 （5 mg）（αE）-[（3,4-dihydroxyphenyl）methylene]-3,4-dihydroxy-β-oxo-benzenepropanenitrile

Rucaparib （5 mg）AG-047； 8-fluoro-1,3,4,5-tetrahydro-2-[4-[（methylamino）methyl]phenyl]-6H-pyrrolo[4,3,2-ef][2]benzazepin-6-one