詳細介紹
商品介紹:
英文名稱:Wortmannin 產品規格:0.5mg CAS:19545-26-7 分子量:428.43 儲存:-20℃,有效期12個月。 別名:KY 12420 描述:Wortmannin 是PI3K 抑制劑,IC50為3nM,抑制自噬體的形成,也有效抑制DNA-PK/ATM,IC50分別為16nM 和150nM. |
產品屬性:
中文名稱:Wortmannin(PI3K抑制劑)
英文名稱:Wortmannin
產品規格:0.5mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
橙色標樁菌間隙連接蛋白29抗體Human EPSTI1 ELISA Kit兔子α2巨球蛋白(A2M)免疫試劑盒
平菇間隙連接蛋白29抗體Human ERAL1 ELISA Kit兔子VGF神經生長因子誘導蛋白(VGF)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌表面趨化因子受體7抗體Human EPAC1(Exchange protein directly activated by cAMP 1) ELISA Kit兔子S100蛋白(S-100)免疫試劑盒
雙孢蘑菇神經母瘤源性分泌蛋白抗體Human ERAP2(Endoplasmic reticulum aminopeptidase 2) ELISA Kit兔子S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒
紙葡萄穗霉染色質修飾蛋白2B抗體Human ENDOG(Endonuclease G) ELISA Kit兔子L選擇(L-Selectin)免疫試劑盒
乳乳球菌乳亞種骨架相關蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體Human EPAC2 ELISA Kit兔子E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬神經蠟樣質脂褐質沉積病蛋白CLN5抗體Human ENO3 ELISA Kit兔子D-乳 免疫試劑盒
雙通道計時定時器 神經蠟樣質脂褐質沉積病蛋白CLN8抗體Human EPB41L1 ELISA Kit兔子D二聚體(D2D)免疫試劑盒
Pseudomonas taiwanensiscereblon蛋白抗體Human ENOPH1 ELISA Kit兔子Dickkopf 1(DKK1)免疫試劑盒
友好戈登氏菌補體C1q和腫瘤壞死因子相關蛋白5抗體Human ENOX2 ELISA Kit兔子C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒
康寧木霉胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1抗體Human ENPP4 ELISA Kit兔子CD34分子(CD34)免疫試劑盒
分枝節桿菌原腸胚雙向形成相關蛋白抗體Human ENOX1 ELISA Kit兔子B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌分裂周期蛋白CDC123抗體Human ENPP6 ELISA Kit兔子8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)免疫試劑盒
大腸埃希菌神經蠟樣質脂褐質沉積病蛋白CLN3抗體Human ENPP5 ELISA Kit兔子6-前列腺F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)趨化樣因子超家族成員3抗體Human ENSA ELISA Kit兔子Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒
游動微菌染色質修飾蛋白1B抗體Human ENTPD2 ELISA Kit兔子4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質量規格:>98%,BRSTEAP家族成員1試劑盒棉籽糖
河生腸桿菌Enterobacter│amnigenus 質量規格:>50%,Ind GradeStathmin 1試劑盒馬來
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>50%,BSSTAT3蛋白抑制分子試劑盒麥冬皂苷B
Wortmannin(PI3K抑制劑)細孢毛霉 3-(3-吡啶基)-L-氨酸骨成型蛋白受體ⅡElisa
球孢白僵 3-羥基鹽酸鹽骨鈣Elisa
木賊鐮孢 D(+)-乳糖一水合物骨堿性磷酸Elisa
仙人掌有孢漢遜酵母 3,4-二甲氧基苯酸骨橋Elisa
薔薇生鏈格孢 叔丁氧羰?;?-氨基己酸骨特異性堿性磷酸Elisa
異常畢赤酵母 二甲基二乙氧基硅烷骨特異性堿性磷酸BElisa
大麗輪枝孢 三苯基膦氫鹽骨涎蛋白Elisa
硫磺(硫色多孔) 2,5-二苯酸骨原交聯Elisa
瓶霉屬 血清胸腺因子固調節元件結合蛋白Elisa
馬德里毛殼 4-氨基-3-甲固調節元件結合蛋白1Elisa
大腸埃希氏(大腸桿) 2,5-二氟苯酸固調節元件結合蛋白1cElisa
柿盤多毛孢 5-溴-8-硝基異喹啉固膽固轉運蛋白NPC1L1Elisa
毛耳白背 乙酸錳胱硫β-合成Elisa
沼澤紅假單胞 2,4-二氟苯酸過氧化氫Elisa
弓形蟲(GT0株) 苯基膦過氧化物Elisa