詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
HC-030031 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
HC-030031是一種有效的選擇性的TRPA1抑制劑,拮抗AITC和福爾馬林誘發的鈣流入,IC50分別為6.2±0.2和5.3±0.2μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:349085-38-7 純度:98.01% 分子式:C??H??N?O? 分子量:355.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
假單胞菌蛋白激C底物Marcks抗體Human HK1(Hexokinase-1) ELISA Kit葡萄糖激(GCK)ELISA Kit
卷枝毛霉卷枝變型腸道分化干MATH-1蛋白抗體Human NCOA6 ELISA Kit葡萄糖6磷異構(GPI)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌磷化絲裂原活化蛋白激MKK7抗體Human NCOA7 ELISA Kit葡萄糖6磷脫氫(G6PD)ELISA Kit
枯草芽胞桿菌磷化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體Human ND1 ELISA Kit葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)ELISA Kit
香魚假單胞菌磷化絲裂原活化蛋白激激4抗體Human NCS1 ELISA Kit葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA Kit
球色單隔孢屬單克抗體Human ND2 ELISA Kit脯肽(PEPD)ELISA Kit
玫瑰色庫克菌線粒體鐵轉運蛋白1抗體Human NARF ELISA Kit脯羥化(PHD)ELISA Kit
地圓形菌磷化原癌基因c-Met抗體Human NAT10 ELISA Kit脯/谷酰富含性剪接因子(SFPQ)ELISA Kit
黃褐環銹傘磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體Human NDC80 ELISA Kit破傷風抗體(Tetanus Ab)ELISA Kit
隱球酵母屬甘露聚糖結合凝集絲肽1抗體Human NBL1 ELISA Kit破骨分化因子(ODF)ELISA Kit
匍枝根霉(黑根霉)胃動受體抗體Human LIPC(Hepatic triacylglycerol lipase) ELISA Kit松龍(PS)ELISA Kit
熒光假單胞菌特異性MLT5蛋白抗體Human PODXL(Podocalyxin) ELISA Kit蘋果脫氫1(MDH1)ELISA Kit
滑菇軟骨基質蛋白抗體Human NCOA3 ELISA Kit平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA Kit
植物乳桿菌植物亞種絲裂原活化蛋白激MKK7抗體Human NCOA5 ELISA Kit平滑肌肌動蛋白(SMA)ELISA Kit
立枯絲核菌甘露聚糖結合凝集絲肽2抗體Human NCOA6 ELISA Kit嘌呤核苷磷化(PNP)ELISA Kit
大腸埃希菌微小染色體維持缺陷蛋白2抗體Human NCOA7 ELISA Kit脾臟酪激(Syk)ELISA Kit
: =DSMZ20023=ATCC14957資源名稱: 鼠李糖乳桿菌 質量規格:BC厚樸酚
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質量規格:70% in H2O大麥芽堿
食砜節桿菌Arthrobacter│sulfonivorans 質量規格:>98.5%梔子苷
TRPA1抑制劑(HC-030031)E2F5 轉錄因子E2F-5抗體正己酯 ≥99.5% (GC)
E2F6 轉錄因子E2F6抗體葉酯 97%
E2 tag E2 tag標簽抗體柳己酯 98%
HPV16 E7 protein 人瘤病16型E7抗體己異戊酯 98%
EAAT1/Glast 膠質谷氨運載蛋白1抗體異戊異戊酯 98%
EAAT2 膠質谷氨運載蛋白2抗體異丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)
EAAT3 膠質谷氨運載蛋白3抗體異丁 ≥99%, FCC
EBNA 3A EB病核抗原-3A抗體異戊 98%