公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BET bromodomain抑制劑(GSK525762A)
英文名稱:GSK 525762A
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:GSK 525762A 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GSK525762A是一種BET bromodomain抑制劑,IC50為32.5-42.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1260907-17-2 別名:I-BET 762 純度:99.85% 分子量:423.9 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
小橢圓接合酵母嗜中性粒抗原CD177抗體Human NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) ELISA Kit人多萜長(zhǎng)二磷寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移(DDOST/OST-48)免疫試劑盒
歧皺青霉鈣整合結(jié)合蛋白1抗體Human NEO1(Neogenin) ELISA Kit人多肽YY(Peptide-YY)免疫試劑盒
葉球鞘單胞菌21號(hào)染色體開放閱讀框7抗體Human MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA Kit人多聚腺苷二磷核糖聚合(PARP)免疫試劑盒
干酪乳桿菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA Kit人多功能蛋白聚糖(versican)免疫試劑盒
假單胞菌屬磷化巨噬集落激因子受體抗體Human SNX1(Sorting nexin-1) ELISA Kit人多巴脫羧(DDC)免疫試劑盒
微球菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA Kit人多巴-β羥化(DBH)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種磷化巨噬集落激因子受體抗體Human JUP(Junction plakoglobin) ELISA Kit人多巴D1受體(D1R)免疫試劑盒
飼料 鉛磷化巨噬集落激因子受體抗體Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit人多巴(DA)免疫試劑盒
南方散斑殼微管結(jié)合蛋白CYLD抗體Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA Kit人對(duì)氧磷-3(PON3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA Kit人對(duì)氧磷(PON)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種磷化CBX5抗體Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit人對(duì)稱二甲基精(SMDA)免疫試劑盒
冠突散囊菌霉抗體Human PPA1(Inorganic pyrophosphatase) ELISA Kit人對(duì)基甲(PABA)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化非受體酪激c-Abl抗體Human RET(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret) ELISA Kit人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)免疫試劑盒
赤曲霉磷化質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Human CASR(Extracellular calcium-sensing receptor) ELISA Kit人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)免疫試劑盒
橢圓孫秀芹氏菌磷化周期依賴激2抗體Human VIPR2(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2) ELISA Kit人端粒逆轉(zhuǎn)錄(TERT)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌 ABacillus│megaterium A de Bary 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品湖貝;YY90410梭砂貝母堿
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格:AR白花前胡乙
巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium de Bary 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)小豆蔻明
BET bromodomain抑制劑(GSK525762A)構(gòu)巢曲霉 3-溴芐β羥丁酸Elisa
青霉 γ-氨基二乙氧基硅烷磷酸化G蛋白偶合受體激2Elisa
少根根霉戴爾變種 L-氨酸4-硝基酰苯鹽酸鹽泛連接蛋白1Elisa
東方纖細(xì)芽孢桿 2-溴-6-甲氧基酪氨酸蛋白激受體A7抗體Elisa
副溶血弧 B酮戊二酸脫氫Elisa
副干酪乳桿 (-)-科里內(nèi)酯4-苯基酮酸脫氫復(fù)合體Elisa
迂回殼囊孢 4'-溴-3-苯酮色C氧化4Elisa
小麥斑鏈格孢 4-甲氧基-3-甲粘蛋白1Elisa
短密青霉 4-硝基鄰苯二甲CUB域EGF樣信號(hào)肽1Elisa
海生嗜鹽球 Sodium mesoxalate monohydrate酮酸脫氫復(fù)合體Elisa
中慢生華癸根瘤 N-芐氧羰基-L-天冬氨酸4-甲酯γ-谷氨酰半胱氨酸合成Elisa
白酒 錳 3-鄰二甲苯醌氧化還原Elisa
芽孢桿 1-異酸辛酯肌聯(lián)蛋白Elisa
地衣芽孢桿 2,8-二溴二苯并噻吩膽固8β羥化Elisa
脲氣球 叔丁基亞磺酰酮戊二酸脫氫Elisa