詳細介紹
商品介紹:
Anagliptin是DPP-4高效選擇性抑制劑,IC50值3.8nM,對DPP-8和DPP-9活性弱10倍以上。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:739366-20-2 別名:SK-0403 純度:98.05% 分子式:C??H??N?O? 分子量:383.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:DPP-4抑制劑(Anagliptin)
英文名稱:Anagliptin
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
意大利青霉Penicillium│italicum 質量規格:0.99洋川芎內酯I
聚團拉布倫茨氏菌Labrenzia│aggregata 質量規格:光譜純SP洋川芎內酯H
杉葉散斑殼Lophodermium│uncinatum Darker 質量規格:0.9洋川芎內酯A
DPP-4抑制劑(Anagliptin)車前草苷D英文名稱: 1-Naphthalene ethanol核仁纖維蛋白抗體包裝1g
車前子(車前)(標準品)英文名稱: 1-Naphthyl acetate鐵蛋白輕鏈抗體包裝250mg
車葉草苷(標準品)英文名稱: 1-Octacosanol肝核因子3抗體包裝5g
沉香(標準品)英文名稱: 1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol果糖1,6-二磷酯抗體包裝100g
沉香四英文名稱: 2,2-Dimethyl-1,3-propanediol6磷果糖激抗體包裝1g
陳皮(標準品)英文名稱: 2,2-Dimethylsuccinic acid肌肉果糖二磷抗體包裝5g
陳皮炭(標準品)英文名稱: 2,7-Dihydroxynaphthalene纖維蛋白原γ鏈抗體包裝5g
橙黃決明(標準品)英文名稱: 2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide纖維蛋白肽B抗體(血纖肽B)包裝100ml
橙皮(標準品)英文名稱: 2-Adamantanol原癌基因c FGR抗體包裝100ml
橙皮苷(標準品)英文名稱: 2-Adamantanone肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體包裝500ml
橙皮(標準品)英文名稱: 2-Bromonaphthalene磷化肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體包裝100g
匙羹藤苷元英文名稱: 2-Chloroacetamide纖連蛋白2抗體包裝25g
匙羹藤新苷元英文名稱: 2-Chloroethanesulfonic acid sodium salt纖連蛋白7抗體包裝5g
匙羹藤葉(標準品)英文名稱: 2'-Deoxyinosine-5'-monophosphate sodium salt彈性蛋白結合蛋白Fcn2抗體包裝10MG
匙羹藤皂苷C(標準品)英文名稱: 2-Ethoxybenzaldehyde范可尼綜合征相關蛋白FAN1抗體包裝1g