詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:抗代謝劑Floxuridine(PEPT1抑制劑)
英文名稱:Floxuridine
產品規格:1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Floxuridine(5-fluorodeoxyuridine)為抗代謝劑,可抑制PEPT1,GI50為5.1μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:50-91-9 別名:5-Fluorouracil 2-deoxyriboside 純度:99.93% 分子量:246.19 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
地衣芽孢桿菌胸腺表達趨化因子抗體Anti-HKDC1 Antibody微纖絲關聯蛋白4(MFAP4)
秦氏蜜環菌磷化微管相關蛋白抗體Anti-HLA-B Antibody微球粒蛋白1(MCRS1)
色串孢屬神經特異性微管蛋白抗體Anti-HLA-DMB Antibody微腦磷脂1(MCPH1)
嗜熱脂肪地芽胞桿菌p53靶蛋白3抗體Anti-HLA-C Antibody(PB0408)微粒體S轉移1(MGST1)
蟬花TRIM35蛋白抗體Anti-HLA-DRA Antibody微精蛋白β(MSMβ)
珞珈蒼黃色桿菌跨膜蛋白16C抗體Anti-HLA-DPB1 Antibody微管關聯絲/蘇激2(MAST2)
構巢曲霉分子伴侶復合體TCP-1α抗體Anti-HLA-DRB1 Antibody微管關聯蛋白τ(MAPτ)
不動桿菌特異激2抗體Anti-HLTF Antibody微管關聯蛋白RP/EB家族成員1(MAPRE1)
圓紅酵母磷化肌動蛋白相關蛋白2抗體Anti-HLA-DQB1 Antibody微管關聯蛋白6(MAP6)
平菇—桃紅平菇轉錄因子相關蛋白TRRAP抗體Anti-HLF Antibody微管關聯蛋白4(MAP4)
桔青霉轉錄因子TBX6抗體Anti-HMBS Antibody微管關聯蛋白2(MAP2)
枯草芽孢桿菌癌/抗原113抗體Anti-HMGB1 Antibody微管關聯蛋白1輕鏈3α(MAP1LC3α)
大腸埃希氏菌O抗原微量凝集定型血清診斷液磷化血管生成受體2抗體Anti-HMGB2 Antibody(PB1054)微管蛋白ε(TUBε)
大腸桿菌磷化血管生成受體2抗體Anti-HMGB3 Antibody微管蛋白δ(TUBδ)
人參土成對桿菌酪激受體A抗體Anti-HMMR Antibody微管蛋白γ2(TUBγ2)
白色金針菇促甲狀腺釋放激抗體Anti-HMGB4 Antibody微管蛋白γ1(TUBγ1)
突觸泡蛋白2C抗體科氏梭菌人淋巴成纖維細胞
突觸囊泡蛋白抗體紫云英根瘤菌人淋巴管內皮細胞
胞吐分泌蛋白Sec8抗體東京根霉人乳腺上皮細胞
神經突觸3抗體根霉屬人胰腺上皮細胞
抗代謝劑Floxuridine(PEPT1抑制劑)大腸埃希氏(大腸桿)* 磺二甲氧嘧啶肝吸蟲Elisa
Nesterenkonia 汞/Hg肝吸蟲抗體 Elisa
匍柄霉 鍺/Ge轉化生長因子-β誘導蛋白IG-H3Elisa
解淀粉芽孢桿 富馬酸二甲酯可溶性凋亡相關因子配體Elisa
矩圓黑盤孢 鎵/Ga脂質運載蛋白-2Elisa
莫爾氏假單胞 別嘌蕈堿型乙酰受體亞型M3Elisa
阿姆斯特丹曲霉 鐵/Fe促胃泌受體Elisa
枯草芽孢桿 銅/Cu類T白血病病抗體Elisa
杏鮑菇 4-氟苯甲肌糖原Elisa
大腸埃希氏桿 銫/Cs6磷酸果糖激1Elisa
南假單胞 三價鉻/Cr(Ⅲ)酮酸激Elisa
糙皮側耳 泰妙乳酸脫氫Elisa
束紅球 鉻/Cr己糖激Elisa
線形大洋螺 總鉻/Cr(T)隱孢子蟲Elisa
Janibacter melonis 去甲替林鹽酸鹽塞內卡病抗體Elisa