詳細介紹
商品介紹:
英文名稱:Torin 1 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Torin1是一種有效的mTORC抑制劑,能夠抑制mTORC1和mTORC2的活性,IC50值分別為2nM和10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1222998-36-8 純度:99.16% 分子量:607.62 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Torin 1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
金針菇組織蛋白G抗體Human RAG1(V(D)J recombination-activating protein 1) ELISA Kit人法尼基二磷法尼基轉移1(FDFT1)免疫試劑盒
解脂鹽紅菌激分子B7-1蛋白抗體Human DUT(Deoxyuridine 5′-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial) ELISA Kit人法尼X受體(FXR)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌1號染色體開放閱讀框145抗體Human SCARB1(Scavenger receptor class B member 1) ELISA Kit人二酰基甘油(DAG/DG)免疫試劑盒
南類芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框186抗體Human NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) ELISA Kit人二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒
猬木霉角蛋白7抗體Human HTN3(Histatin-3) ELISA Kit人二氫嘧啶脫氫[NADP+](DPYD)免疫試劑盒
溶血不動桿菌基因型4間隙連接蛋白26抗體Human SRD5A1(3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 1) ELISA Kit人二氫嘧啶樣3(DPYSL3)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌膜輔蛋白抗體Human EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) ELISA Kit人二氫嘧啶樣2(DPYSL2)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌F肌動蛋白α1亞基抗體Human MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人二羥基賴正己(DHLNL)免疫試劑盒
抗生鏈霉菌CD8抗體Human NEO1(Neogenin) ELISA Kit人二磷腺苷(ADP)免疫試劑盒
黃桿菌CD8抗體Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA Kit人二磷尿核苷葡糖基轉移2家族肽B4(UGT2B4)免疫試劑盒
小孢根霉原變種表面趨化因子受體2抗體Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA Kit人二氧化(DAO)免疫試劑盒
中慢生根瘤菌胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA Kit人兒茶酚抑免疫試劑盒
溜曲霉趨化樣蛋白抗體Human JUP(Junction plakoglobin) ELISA Kit人兒茶酚(CA)免疫試劑盒
多孢木霉角蛋白20抗體Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit人鵝膏蕈堿免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌鈣激活的中性蛋白2抗體Human EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) ELISA Kit人多藥耐藥相關蛋白(MRP)免疫試劑盒
臭曲霉CD45RO抗體Human IZUMO1(Izumo sperm-egg fusion protein 1) ELISA Kit人多效生長因子(PTN)免疫試劑盒
短鏈孢霉屬Selenotila│sp. 質量規格:鈉型榿木
根霉Rhizopus│sp. 質量規格:for GC,≥99.5%(GC)款冬
Methanobrevibacter smithiiMethanobrevibacter smithii 質量規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)偽原薯蕷皂苷
mTORC抑制劑(Torin1)奧斯陸莫拉氏 3,5-二氟苯甲紅C3b受體Elisa
紅緣層孔 2-乙基呋喃鈣調依賴性蛋白激1Elisa
不等彎孢 2-氨基-2-甲基-1- 鹽酸鹽肌酸激Elisa
米根霉 4-硝基-2-(三氟甲基)苯甲對甲酚Elisa
膠韌革 4--2-三氟甲平滑肌肌球蛋白輕鏈激Elisa
金黃色葡萄球 4-羥基-2-(三氟甲基)苯鈣調依賴性蛋白激1Elisa
米根霉 4--2-三氟甲膽汁酸Elisa
枯草芽孢桿 4-羥基-2-三氟甲酸P4Elisa
球形節桿 4-溴-2-(三氟甲基)TotalTElisa
側孢短芽孢桿 4,5-二甲氧基-3-苯甲5羥色1a受體Elisa
金色鏈霉 3,3-二乙氧基烯酸乙酯絲切蛋白1Elisa
芽孢桿屬 3-吡咯烷-1-甲酸芐酯α1-抗胰蛋白Elisa
大杯蕈 N-乙烯基-N-甲基乙酰轉膠蛋白2Elisa
產堿假單胞 AxitinibX-脯氨酰氨肽2Elisa
盤長孢狀盤孢 六溴環十二烷煙酰腺嘌呤二核苷磷酸Elisa