詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:AMG 232
產品規格:2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:AMG 232 產品規格:2mg|5mg|10mg|50mg|100mg AMG232是一種有效的p53-MDM2相互作用抑制劑,在SJSA-1細胞中,IC50值為9.1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1352066-68-2 純度:99.73% 分子量:568.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
異常威克漢姆酵母磷化絲裂原活化蛋白激ERK抗體Human JUN(Transcription factor AP-1) ELISA Kit犬血栓調節蛋白(TM)免疫試劑盒
石面單胞菌屬CD312抗體Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)免疫試劑盒
野野村氏菌屬eIF4E結合蛋白抗體Human COQ3 (Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase, mitochondrial) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化表皮生長因子受體抗體Human RBBP4 (Histone-binding protein RBBP4) ELISA KIT犬血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)免疫試劑盒
堆肥鞘桿菌磷化表皮生長因子受體抗體Human HN1L (Hematological and neurological expressed 1-like protein) ELISA KIT犬血管緊張轉化2(ACE2)免疫試劑盒
堅強芽孢桿菌肝配蛋白A1受體抗體Human OTX1 (Homeobox protein OTX1) ELISA KIT犬血管緊張轉化(ACE)免疫試劑盒
根瘤菌真核翻譯起始因子2C2抗體Human HCST (Hematopoietic cell signal transducer) ELISA KIT犬血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌眼睛發育缺失蛋白EYA2抗體Human HORMAD2 (HORMA domain-containing protein 2) ELISA KIT犬血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌EYA4蛋白抗體Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌血清反應因子輔助蛋白1抗體Human GADD45G (Growth arrest and DNA damage-inducible protein GADD45 gamma) ELISA KIT犬胸腺基質淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒
紫孢側耳(美味側耳)吞噬運動蛋白2抗體Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit犬胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌紅膜條帶4.1蛋白抗體Human HARBI1 (Putative nuclease HARBI1) ELISA KIT犬心型脂肪結合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒
pQE31磷化紅生成受體抗體Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) ELISA KIT犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
毛殼轉錄調節因子E2F7抗體Human HAND1 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 1) ELISA KIT犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
小鼠小短桿菌膠質谷運載蛋白4抗體Human HAND2 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 2) ELISA KIT犬纖溶原激活物抑制劑1(SERPINE1)免疫試劑盒
巴斯德畢赤酵母erbB3結合蛋白1抗體Human GRTP1 (Growth hormone-regulated TBC protein 1) ELISA KIT犬細小病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒
腸膜狀明串珠菌Leuconostoc│mesenteroides 質量規格:鹽野靛堿
皺紋假單胞菌Pseudomonas│corrugata 質量規格:濕楊芽黃
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:干鴉膽子D
p53-MDM2相互作用抑制劑(AMG 232)運動發酵單孢 D-半乳糖烯痘病Elisa
赤褐鵝膏 2-乙酰基-6-甲氧基吡啶B病Elisa
食用油 B 1 異噁唑-5-甲酸逆轉錄病Elisa
樟疫霉 FMOC-L-2-氨酸缺陷病Elisa
桔梅奇酵母 FMOC-L-3-氨酸T趨向性病1型Elisa
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 L-谷氨酸-15N尿酸Elisa
產氣莢膜梭 C型 脒基硫脲結核Elisa
熒光假單胞 1,5-萘二磺酸,四水肌鈣蛋白TElisa
嗜松青霉 3-溴聯苯心肌特異性肌鈣蛋白TElisa
短小芽孢桿 2-聯苯牛血清白蛋白Elisa
鍺栓孔 二乙基二硫代氨酸銨白介18Elisa
粗糙脈孢 α-羥基異丁酸甲酯B皰疹病抗體Elisa
毛球馬勃屬 4-(Boc-氨基)-3-吡啶B皰疹病抗原Elisa
蠟狀芽孢桿 4-三氟甲硫基芐溴胰高血糖Elisa
宇佐美曲霉B1變種 3,3'-二羥基二苯二硫胰島Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)