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G9a/GLP抑制劑(A-366)

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更新時間:2022-05-07 15:30:02瀏覽次數(shù):287

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號 GOY-01X10783 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 A-366
G9a/GLP抑制劑(A-366)公司*的產(chǎn)品:Human matrilysin,MAT ELISA Kit 人質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶木糖 99%
Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽D-木糖 98%
Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Ki

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:G9a/GLP抑制劑(A-366)

英文名稱:A-366

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

A-366是一種肽競爭性G9a/GLP抑制劑,IC50為~3nM,比作用于其他甲基轉(zhuǎn)移酶和表觀遺傳靶點的選擇性高100多倍。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

CAS號:1527503-11-2

純度:98.83%

分子量:329.44

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

②生物膜與細胞器的研究;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調(diào)控;

⑤細胞分化及其調(diào)控;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化;

⑧細胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

枯草芽孢桿菌絲/蘇蛋白激TNN13K抗體Anti-HAVCR1 Antibody無脈絡(luò)膜蛋白(CHM)

根瘤菌環(huán)指蛋白16抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員9B(WNT9B)

游動球菌胸腺五肽抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員7B(WNT7B)

大腸埃希菌白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HBA1; Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員7A(WNT7A)

芽孢桿菌屬磷化白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HAVCR2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員5B(WNT5B)

平田頭菇腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白2抗體Anti-HCN1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)

微綠蠟質(zhì)菌癌抗雌激抵抗蛋白2抗體Anti-HBD Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員4(WNT4)

枯草芽孢桿菌枯草亞種凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)抗體Anti-HCN2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)

釀酒酵母腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體Anti-HCVAg Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)

PL12(平菇)腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體Anti-HDAC10 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)

水生黃桿菌神經(jīng)干抑制相關(guān)蛋白TRIM32抗體Anti-HDAC11 Antibody(PB0674)無翅型MMTV整合位點家族成員11(WNT11)

運動節(jié)桿菌抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)

抗生鏈霉菌速激肽受體3抗體Anti-HDAC2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員10A(WNT10A)

紅細菌屬凋亡相關(guān)蛋白5抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)

腐皮鐮刀菌微管蛋白γ/Tubulin γ抗體Anti-HDAC4 Antibody無孢蛋白(ASPN)

嗜乳桿菌血管生成受體1抗體Anti-HDAC5 Antibody蝸管蛋白(COIL)

肌漿網(wǎng)鈣ATP1/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP1抗體解脂亞羅酵母人輸尿管上皮細胞

SPNS1抗體溜曲霉人腎管狀上皮細胞

電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體分枝犁頭霉人胎盤羊膜細胞

結(jié)合珠蛋白家族3A1抗體紅曲霉屬人胚胎滋養(yǎng)層細胞
G9a/GLP抑制劑(A-366)釀酒酵母 5--8-羥基-7-喹啉磷酸化酪氨酸激Elisa

山夫頓堡沙門氏 鈦/Ti酮酸氧化Elisa

匍匐曲霉原變種 碲/Te胰島受體αElisa

大杯香菇 鉭/Ta囊尾蚴抗體Elisa

解脂假絲酵母 鍶/Sr高致病性藍耳病抗體Elisa

解淀粉芽孢桿 錫/Sn超氧化物歧化Elisa

Rathayibacter caricis 硅酸根/SiO32-脂質(zhì)運載蛋白-2Elisa

棒黃曲霉 二氧化硅/SiO2過氧化6Elisa

靈芝 硅/SiN-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa

雞腿菇cc968 硒/Se總蛋白Elisa

越桔假絲酵母 鈧/ScS100鈣結(jié)合蛋白A9Elisa

黑曲霉 銻/Sb可溶性EndoglinElisa

釀酒酵母 1-(4-基苯基)-3-甲基-5-吡唑酮(4CMP)可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1Elisa

匍匐曲霉原變種 銻/SbElisa

靈芝屬 5--8-羥基喹啉還原Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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