公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:20S蛋白酶體抑制劑(MG-132)
英文名稱:20S proteasome inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:20S proteasome inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格:5mg|10mg|50mg|100mg MG-132是一種有效的非特異性的20S蛋白酶體(20S proteasome)抑制劑,作用于β5糜蛋白酶樣(β5chymotrypsin)活性位點(diǎn),IC50為24.2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):133407-82-6 純度:98.0% 分子量:475.62 MG-132結(jié)構(gòu)式 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
耐冷類諾卡氏菌鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體Human ERGIC1 ELISA Kit兔子白介3(IL-3)免疫試劑盒
紅細(xì)菌屬周期蛋白結(jié)合蛋白抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子白介2(IL-2)免疫試劑盒
球孢白僵菌分裂周期蛋白2抗體Human ERGIC2 ELISA Kit兔子白介1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)免疫試劑盒
酪丁梭菌DNA分裂周期調(diào)控蛋白45抗體Human ERBB3 ELISA Kit兔子白介1β (IL-1β)免疫試劑盒
橄欖產(chǎn)色鏈霉菌染色體相關(guān)蛋白H抗體Human ERBB4(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4) ELISA Kit兔子白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
簡(jiǎn)青霉中心體蛋白質(zhì)76抗體Human EPB41L2 ELISA Kit兔子白介18(IL-18)免疫試劑盒
Streptococcus sanguinis中心體蛋白152抗體Human ERC1 ELISA Kit兔子白介13(IL-13)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗體Human EPB41L3 ELISA Kit兔子白介11(IL-11)免疫試劑盒
山東糖多孢菌唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體Human EPHA6 ELISA Kit兔子白介10(IL-10)免疫試劑盒
水稻腸桿菌趨化樣因子超家族成員8抗體Human EPHA7 ELISA Kit兔子白介1(IL-1)免疫試劑盒
擬康氏木霉趨化樣因子超家族成員1抗體Human EPHX2 ELISA Kit兔子γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
梭菌神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體Human EPHA8 ELISA Kit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)免疫試劑盒
腦膜膿性金黃桿菌甘結(jié)合蛋白抗體Human EFNB1(Ephrin B1) ELISA Kit兔子β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種多巴D1受體相互作用蛋白抗體Human EPN3 ELISA Kit兔子β4整合(ITG β4/CD104)免疫試劑盒
鏈格孢 蘋果專化型Capicua蛋白抗體Human EPRS ELISA Kit兔子α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
釀酒酵母碳酐6抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSyndecan-1/CD138試劑盒麥冬皂苷C
門多薩假單胞菌Pseudomonas│mendocina 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSWI/SNF相關(guān), 基質(zhì)關(guān)聯(lián),肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子,亞家族c,成員1試劑盒麥冬皂苷A
糙皮側(cè)耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSTEAP家族成員4試劑盒馬兜鈴內(nèi)酰
20S蛋白酶體抑制劑(MG-132)阿維鏈霉 Boc-N-甲基-O-芐基-L-酪氨酸谷氨酸受體1Elisa
大腸埃希氏桿 3,5-二氟苯甲谷氨酸受體2Elisa
蚜蟲莫氏黑粉 3,4-二氟苯谷氨酸脫氫Elisa
樟疫霉 2,5-二基溴化鎂 (1M THF溶液)谷氨酸脫羧65Elisa
楊生盾殼霉 2,3-二氟三氟甲苯谷氨酰Elisa
Lysinibacillus xylanilyticus 3,4-二氟苯Elisa
尖孢鐮孢 氨基三亞甲基膦酸過(guò)氧化Elisa
蝙蝠蛾擬青霉 N-CBZ-羥脯氨酸甲酯硒過(guò)氧化3Elisa
泡盛曲霉 2,3-二氟骨保護(hù)Elisa
釀酒酵母 三(N,N-四亞甲基)磷酰骨保護(hù)配體Elisa
釀酒酵母 二乙基鋅骨成型蛋白2Elisa
大腸埃希氏 1-溴-2-(三氟甲氧基)苯骨成型蛋白4Elisa
混料芽孢桿 氧化鈀,一水骨成型蛋白6Elisa
麥根腐平臍蠕孢 順二酸二丁基錫骨成型蛋白7Elisa
黑木耳 對(duì)位紅骨成型蛋白受體1AElisa