詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
3×50ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 髓鞘染色,石蠟切片 注意事項: 染色結果為:髓鞘呈深綠色,脫髓鞘纖維不著色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鹽番茄堿(標準品)英文名稱: Chlorprothixene孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體包裝25g
鹽黃柏堿(標準品)英文名稱: Imidazole鈉轉運體蛋白抗體包裝5g
鹽黃連堿(標準品)英文名稱: RetapamulinP物質受體抗體包裝25g
鹽毛果蕓香堿(標準品)英文名稱: Lactulose神經激肽B受體抗體包裝5g
鹽青藤堿(標準品)英文名稱: FTIBAMZONE腫瘤轉移抑制基因抗體包裝5g
鹽去氫駱駝蓬堿(標準品)英文名稱: Rhapontin腫瘤抑制基因抗體包裝25g
鹽石蒜堿(標準品)英文名稱: Benzhexol hydrochloride腫瘤抑制基因抗體包裝5g
鹽甜菜堿(標準品)英文名稱: Folic acid孤菲肽/痛敏肽抗體包裝100g
鹽小檗(標準品)英文名稱: Calcium gluconate軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體包裝25g
鹽小檗堿(標準品)英文名稱: Pyran pamoate神經元引導蛋白3抗體包裝1g
鹽藥根堿(標準品)英文名稱: Pamoic acid性受體NK-p46抗體包裝5g
鹽伊立替康(標準品)英文名稱: Phenolphthalein神經組織特異性F肌動蛋白結合蛋白2抗體包裝25g
鹽益母草堿(標準品)英文名稱: VanillinNYS48蛋白抗體包裝1g
鹽育亨賓(標準品)英文名稱: Ciclopirox肌痙攣性癲癇病相關EPM2蛋白抗體包裝250mg
羊膽粉(標準品)英文名稱: Ciclopirox非霍奇金淋巴瘤重復蛋白2抗體包裝1g
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質量規(guī)格:>98%,標準品結核菌桿抗體IgG試劑盒重樓皂苷I;Chonglou Sapon
普通赤細菌Erythrobacter│vulgaris 質量規(guī)格:>99%,培養(yǎng)級結核菌桿試劑盒粗莖;Crassicauline
ATCC35666資源名稱: 停乳鏈球菌 質量規(guī)格:≥95%,BR結合珠蛋白/觸珠蛋白試劑盒橙黃Ⅳ;Orange IV
髓鞘染色液(固綠法)宇佐美曲霉 6--2,3-二色P4502E1Elisa
熱栗色鏈霉 4-(2,4-二苯氧基)色P450c21A;21-羥化Elisa
玉米黑粉 2,6-二溴苯并噻唑色P450c21B;21-羥化Elisa
峨眉山鏈霉 6-(2,3-Dimethyl-5-sulfo-3H-indol-3-yl)hexanoic aci色氧化4Elisa
球孢白僵 L-O-磷酸絲氨酸外信號調節(jié)激Elisa
枯草芽孢桿 3-氟-5-周期D1Elisa
暗黃紫鏈霉 3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸纖連蛋白Elisa
枯草芽孢桿 3-三氟甲基-2-吡啶甲纖溶原激活物抑制因子1Elisa
淺紫灰鏈霉產色變種 2,3,5-三異煙酸纖維蛋白原Elisa
佛羅里達側耳 4-溴-2,3-二氟苯甲煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa
溶血 對溴苯酸乙酯酰基氧化Elisa
雅致小克銀漢霉 GW3965 鹽酸鹽線粒體核糖體蛋白S11Elisa
馬爾他布魯氏 2-氨基-5-甲酰腺甘酸激Elisa
鴨疫里氏桿 3-氟-4-甲腺苷酸環(huán)化Elisa
乳糖細黃鏈霉 反式-2-己烯腺苷酸活化蛋白激Elisa