詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GW311616 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
GW311616是高活性,可滲透入細胞,生物相容性,長效的人中性白細胞彈性蛋白酶(HNE)抑制劑,IC50為22nM,是GW311616A的游離堿形式。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:198062-54-3 純度:99.30% 分子量:397.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
腦膜炎奈瑟菌支鏈基轉2抗體Human GSG1L ELISA Kit小鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
金龜子綠僵菌BCL2相關蛋白A1抗體Human GSPT2 ELISA Kit小鼠草膦乙酰轉移(PAT)免疫試劑盒
谷棒桿菌B淋巴瘤蛋白3抗體Human GPRIN3 ELISA Kit小鼠不對稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒
釀酒酵母轉錄因子MYB相關蛋白B抗體Human GPS2 ELISA Kit小鼠補體因子H(CFH)免疫試劑盒
腐生葡萄球菌腐生亞種防御β1/Defensin β1抗體Human GPSM2 ELISA Kit小鼠補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
釀酒酵母B活化因子受體抗體Human GPX4 ELISA Kit小鼠補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
喜肌費爾酵母TNF家族B激活因子抗體Human GPX7 ELISA Kit小鼠補體蛋白5(C5)免疫試劑盒
橄欖鏈霉菌蛇巴曲抗體Human GPX5 ELISA Kit小鼠補體蛋白4(C4)免疫試劑盒
青紫黑鏈霉菌大腦蛋白2抗體Human GPX8 ELISA Kit小鼠補體蛋白3(C3)免疫試劑盒
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34程序性死亡配體1抗體Human GRAMD1B ELISA Kit小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒
乳微桿菌B7-H4抗體Human GRAMD4 ELISA Kit小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒
小馬勃3-2β分泌抗體Human GRB7 ELISA Kit小鼠型肝炎抗體(IgG)免疫試劑盒
東方伊薩酵母相關死亡促進因子Bad抗體Human GRHPR(Glyoxylate Reductase/Hydroxypyruvate Reductase) ELISA Kit小鼠激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒
冷湖黃桿菌BaxHuman GRID1 ELISA Kit小鼠激(PK)免疫試劑盒
少根根霉程序性死亡配體2抗體Human GPS2 ELISA Kit小鼠二酰脫羧,線粒體(MLYCD)免疫試劑盒
解蛋白弧菌膽汁鹽輸出泵/ATP結合盒轉運蛋白11抗體Human GPSM2 ELISA Kit小鼠二單酰(malonyl CoA) 免疫試劑盒
: =DSM44958=JCM12462資源名稱: 氧化假諾卡氏菌 質量規格:純度(銅):52.5~56.5%β葡萄糖苷試劑盒3,4,5-三氧基
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>99%,BRβ葡萄糖苷試劑盒3,4,5-三氧基酯
豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 質量規格:(Cu):36.0~38.0%,Tech Gradeβ萘酚試劑盒楊酯
HNE抑制劑(GW311616)五加皮(標準品)英文名稱: Ginkgolide CNFkB誘導激抗體包裝500g
五靈脂(標準品)英文名稱: Ginkgolide J核因子p50/k基因結合核因子抗體包裝250g
五合硫金雀花堿/硫鷹爪豆堿英文名稱: Cryptotanshinone神經激肽A受體/K物質受體抗體包裝5g
五味藤(標準品)英文名稱: Cryptotanshinone神經激肽B抗體包裝100g
五味子(標準品)英文名稱: Taurochenodeoxycholic acid神經粘蛋白抗體包裝25g
五味子(標準品)英文名稱: Cryptochlorogenic acid神經束蛋白抗體包裝1g
五味子(標準品)英文名稱: Biochanin A高分子量神經絲蛋白抗體包裝25g
五味子乙(標準品)英文名稱: Biochanin A核因子/k基因結合核因子抗體包裝5g
五味子酚(標準品)英文名稱: Naringin低分子量神經絲蛋白抗體包裝1g
五味子(標準品)英文名稱: Lupeol中分子量神經絲蛋白抗體包裝500mg
五味子英文名稱: Tectoridin生長抑制蛋白NDN抗體包裝5g
五味子烯(標準品)英文名稱: Tectorigenin神經生長因子β抗體包裝100mg
五味子乙(標準品)英文名稱: Procyanidin B2鼻咽癌相關基因6抗體包裝25g
五味子酯(標準品)英文名稱: Protopanaxdiol鈉氫通道蛋白抗體包裝5g
五味子酯戊英文名稱: Protopanaxatriol鈉離子轉運蛋白抗體包裝1g