詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
XL413 hydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
XL413hydrochloride是一種有效的,選擇性的,ATP競爭性的Cdc7抑制劑,IC50值為3.4nM,同時對CK2和PIM1的IC50值分別為215和42nM,對pMCM的EC50值為118nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1169562-71-3 純度:99.76% 分子量:326.18 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
毛木耳兔抗雞IgM抗血清Anti-RAD51C Antibody基質衍生因子2(SDF2)
枯草芽孢桿菌兔抗狗IgG抗血清Anti-Rad9b Antibody基質衍生因子1(SDF1)
馬賽菌兔抗羊IgM抗血清Anti-RAG1 Antibody基質抗原3(STAG3)
大腸埃希氏菌兔抗豚鼠IgG抗血清Anti-Rad9/Rad9a Antibody基質抗原2(STAG2)
兔抗豚鼠IgM抗血清Anti-RAG2 Antibody基質抗原1(STAG1)
釀酒酵母兔抗人IgG抗血清Anti-RAF1 Antibody基質金屬蛋白9(MMP9)
塔賓曲霉兔抗人IgM抗血清Anti-RALA Antibody基質金屬蛋白8(MMP8)
棒孢擬盤多毛孢兔抗猴IgG抗血清Anti-RALB Antibody基質金屬蛋白7(MMP7)
癬囊腔菌兔抗猴IgM抗血清Anti-RALBP1 Antibody基質金屬蛋白3(MMP3)
解淀粉芽孢桿菌兔抗小鼠IgG抗血清Anti-RALBP1 Antibody基質金屬蛋白28(MMP28)
竹蓀D優1號兔抗小鼠IgM抗血清Anti-RALBP1 Antibody基質金屬蛋白27(MMP27)
副豬嗜血桿菌兔抗小鼠k-鏈抗血清Anti-RANBP1 Antibody基質金屬蛋白26(MMP26)
農研所溶桿菌兔抗小鼠IgG-Fc段抗血清Anti-RAPGEF2 Antibody基質金屬蛋白24(MMP24)
胡椒枯萎病兔抗長爪沙鼠IgG抗血清Anti-RANBP2 Antibody基質金屬蛋白23B(MMP23B)
分枝節桿菌驢抗人IgG抗血清Anti-RAP1A Antibody基質金屬蛋白23A(MMP23A)
大腸埃希菌驢抗羊IgG抗血清Anti-RAN Antibody基質金屬蛋白21(MMP21)
神經細胞增殖和分化調控蛋白1抗體土脂環芽孢桿菌小鼠腎足突細胞提取物
NOTCH調節錨蛋白抗體索氏離蠕孢(小麥根腐病菌)小鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物
神經囊泡膜蛋白1抗體疣梗曲霉小鼠皮下脂肪細胞提取物
突觸生長相關蛋白抗體好食脈孢菌小鼠表皮角質形成細胞提取物
Cdc7抑制劑(XL413 hydrochloride)Diaminobutyricimonas 鴨腳木堿
短小芽孢桿 早熟Ⅱ
芽孢桿 N-阿魏酰真蛸; N- 阿魏酰章魚
爪哇青霉 N-對香豆酰真蛸
沃氏富鹽 3,4-二氫-1H-2-苯并吡喃
干酪乳桿 野甘草酸
串珠鐮孢 葡聚糖T40
Pseudomonas psychrotolerans 克羅酰
哈爾濱糖霉 3-氧代甘遂-7,24-二烯-21-酸
鷹嘴豆枯萎鐮刀 二磷酸腺苷
黑曲霉 野鴉椿B
腐皮鐮孢 異地黃苷
Sphingomonas 3-異丁基-1-甲基
非脫羧勒克氏 粘毛黃芩I
香菇 銀線草內酯