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腫瘤細胞在大多數甲醛固定的組織在開始染色之前都需要先修復抗原，這是由于在固定過程中產生了亞甲基橋使蛋白之間交聯屏蔽了抗原位點。兩種抗原修復方法為熱修復法（稱之為熱誘導抗原表位修復或HIER）和酶解法。這些修復方法原理都是將亞甲基橋打斷，使抗原表位暴露出來，以便于抗體結合。有的抗原適合酶解修復，有的抗原適合熱修復。酶解修復有時會損壞組織的形態結構，因此需要摸索酶濃度和作用時間。
熱抗原修復方法有高壓蒸汽法、微波法或蒸煮鍋法。或者將玻片置于修復溶液中60°C水浴過夜。除非抗原修復方法在抗體數據表中可以找到，否則必須通過實驗來確定適宜的修復。
熱修復緩沖液：
1）枸櫞酸鈉緩沖液(10 mM Sodium Citrate, 0.05% 吐溫- 20, pH 6.0)；
2）1 mM EDTA, 調至pH 8.0；
3）Tris/EDTA 緩沖液(10mM Tris, 1 mM EDTA 溶液, 0.05% 吐溫-20, pH 9.0)。
對于一個特定的抗體，在沒有其他研究者建議的情況下，腫瘤細胞要通過實驗確定選用哪種修復緩沖液。
熱修復法，使用的修復液、處理的方法、溫度和時間都需要適當的摸索。
500G    一水醋酸鈣        CALCIUM ACETATE, MONOHYDRATE        
500G    鹽酸胍        GUANIDINE HYDROCHLORIDE        22919-26-2
5 KG    鹽酸胍        GUANIDINE HYDROCHLORIDE        492-62-6
1 Kg    亞硝酸鈉        SODIUM NITRITE        
2.5 KG    亞硝酸鈉        SODIUM NITRITE        
100G    亞氯酸鈉        SODIUM CHLORITE        
1 Kg    亞氯酸鈉        SODIUM CHLORITE  
腫瘤細胞