公司動(dòng)態(tài)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞一般過(guò)程
閱讀:85 發(fā)布時(shí)間:2017-9-4一、轉(zhuǎn)化細(xì)胞準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備工作對(duì)開(kāi)展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無(wú)法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。
二、取材
在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過(guò)一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過(guò)程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。
理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實(shí)際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個(gè)體的組織容易培養(yǎng),分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培養(yǎng)時(shí),可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時(shí)應(yīng)嚴(yán)格保持無(wú)菌,同時(shí)也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時(shí)容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。
三、培養(yǎng)
將取得的轉(zhuǎn)化細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過(guò)程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,幾個(gè)小時(shí)后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基。如系細(xì)胞培養(yǎng),一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細(xì)胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后,立即放入培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞盡早進(jìn)入生長(zhǎng)狀態(tài)。
正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時(shí)間觀察一次,觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長(zhǎng)良好,形態(tài)是否正常,有無(wú)污染,培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對(duì)培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時(shí)檢查。
IL21R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞