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1. 直接適應——細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基中。

一些類型細胞可直接從包含血清的培養基適應無血清培養基。對于直接適應，接種細胞密度應該:2.5×105~3.5×105細胞/ml。當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml時，傳代培養細胞。當細胞密度在培養4到7天后達到2×106~4×106細胞/ml時，細胞*適應了無血清培養基。每隔3~5天，當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml，細胞活率在90%時，貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。

2. 連續適應——分好幾步把細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基(SFM)中，與直接適應相比較，連續適應趨向對于細胞更加溫和一些。

●以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養物到75%有血清培養基：25%SFM 混合培養基中，傳代培養。

●當細胞密度>5×105細胞/ml時，以2×105到3×105細胞/ml細胞密度，在有血清培養基：SFM為50∶50的混合培養基中傳代培養。

●以2×106到3×106細胞/ml細胞密度，25%有血清培養基和75% SFM中傳代培養。

●當細胞密度達到1×106到3×106細胞/ml(接種后4到6天)，在100%SFM培養基中傳代培養。

●每隔3到5天，當細胞密度達到1×106到3×106細胞/ml，細胞活率在90%時，貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。

建議備份前一次混合培養的培養物，直到每一次細胞適應了新的混合培養基。每一次減少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培養基中進行幾次傳代。

在適應過程中，不要讓細胞生長過度。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意，與有血清培養基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白質，因而更易于受外界因素的影響。細胞培養適應替代血清：許多細胞利用連續適應方法能很好的適應，用包含FBS的的培養基和包含有替代血清的培養基1∶1(v∶v)的混合培養基培養細胞。通過下列的混合培養基的方式，連續幾代減少當前培養基的量：1∶2，1∶4，1∶16和100%替代培養基。每次適應改變血清比例時，傳代細胞2到3次。培養可以直接從FBS轉換到替代血清。一開始就使用相同于FBS的濃度的替代物或血清，生長的延遲可能會發生，4允許進行2到3次的傳代，使生長率恢復到以前的水平。特別需要強調的是：配制無血清培養液必須使用高質量的水，如石英玻璃蒸餾器經三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為無血清培養基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子，既便水中的有毒物質含量甚微，也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養能否成功的關鍵因素之一。