一、細胞周期檢測

1.概念

細胞周期是指細胞從上一次分裂完成開始，到下一次分裂完成時為止，包括兩個階段：分裂間期和分裂期。細胞周期檢測的是單個細胞的增殖速度，通過縮時攝影來測定。

2.原理

細胞在不同的時期，細胞所含的DNA量不同。正常細胞的二倍體含量通常為2N，則在G/G1期，細胞的DNA量為2N，而G2/M期細胞DNA含量為4N。S期DNA量為2N—4N。碘化丙錠（PI）可以與細胞內(nèi)的DNA和RNA結(jié)合，通過RNA酶將RNA消化后，檢測到與DNA結(jié)合的PI熒光強度可以直接反映細胞內(nèi)DNA含量的多少。因此，采用流式細胞術(shù)PI染色法檢測細胞內(nèi)DNA含量時，可將細胞周期分為G/G1期、S期和G2/M期，并通過特殊軟件計算各時相的百分比。  

細胞周期檢測結(jié)果展示

二、細胞克隆實驗

1. 概念

細胞克隆，又稱為細胞集落，指的是單個細胞在體外增殖6代以上，其后代所形成的細胞群體。細胞克隆實驗的目的是檢測細胞的增殖能力、細胞侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的重要技術(shù)方法。

2.原理

接種細胞后，只有同時具有貼壁和增殖活力的細胞才會形成克隆。克隆形成率反映細胞的獨立生存能力的強弱，用于評價細胞群體依賴性和增殖能力。克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系，在進行測定時需要將接種的單個細胞分散為懸液，并直接接種在培養(yǎng)皿中進行持續(xù)一周以上的培養(yǎng)，并在此期間進行檢查。當(dāng)出現(xiàn)新的、由單個原始生長出來的完整幾何結(jié)構(gòu)時，則可以停止培養(yǎng)過程。

細胞克隆結(jié)果展示

三、細胞凋亡實驗

1.概念

細胞凋亡是指細胞在一定的生理或病理條件下，受內(nèi)在遺傳機制控制，按照自身程序主動性、生理性的死亡過程。細胞凋亡受凋亡相關(guān)基因調(diào)控，故又稱為程序性細胞死亡。

2.原理

一般而言，細胞凋亡的早期主要涉及胞內(nèi)一些蛋白質(zhì)的變化，如蛋白質(zhì)量的增加、位置的轉(zhuǎn)移、狀態(tài)的改變等，還有一些磷脂和Ca2+含量的變化；中晚期則伴隨著DNA斷裂和凋亡小體的形成；而整個凋亡過程中細胞形態(tài)也會發(fā)生改變。

四、細胞侵襲實驗

1.概念

細胞侵襲實驗是將細胞小室（Transwell小室）放入培養(yǎng)板中，上室（細胞小室）內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室（培養(yǎng)板）內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。將細胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜的通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。

2.原理

細胞侵襲指細胞在原位突破基底膜，然后內(nèi)滲進入血管、淋巴管的過程。

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五、細胞遷移實驗

1. 概念

細胞遷又稱為細胞移動、細胞爬行或細胞運動，是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動。

2. 原理

細胞遷移實驗是測定細胞遷移運動與修復(fù)能力的方法，類似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其他硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設(shè)定的時間，取出細胞培養(yǎng)板，觀察周邊細胞是否生長至中央劃痕區(qū)，以此判斷細胞的生長遷移能力，實驗通常需設(shè)定正常對照組和實驗組，實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等組別，通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)的修復(fù)能力，可以判斷各組細胞的遷移與修復(fù)能力。

細胞遷移實驗結(jié)果展示

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