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P4HB抗體

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更新時間:2023-03-01 12:57:48瀏覽次數:214

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50ul 100ul 200ul
貨號 GOY-01K0050 應用領域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 P4HB
抗體來源 Mouse 分類 抗體/一抗
P4HB抗體公司正在出售的產品:產品名稱:蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)產品名稱:蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)產品名稱:酪氨suan酶(TYR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tyrosinase (TYR)

詳細介紹

抗體的制備過程:

1. 免疫原的制備

普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物

常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定

得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存

建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
交叉反應:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian  

產品名稱

英文名稱

貨號

P4HB抗體

P4HB

GOY-01K0050

商品介紹:

規格:50ul  100ul 200ul

產品分類:抗體 / 一抗

標記: Unconjugated

抗體來源: Mouse

抗體類型: Monoclonal

克隆號: G5D12

蛋白細胞定位: 細胞漿,細胞膜

純化方法: Affinity purified by Protein G

亞型 IgG

性狀: Liquid

濃度: 1mg/ml

儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

背景資料: 蛋白質二硫鍵異構酶,也稱為脯氨酰4-羥化酶(P4HB)的β亞單位,是一種由P4HB基因編碼的酶。人類P4HB基因定位于染色體17q25。與其他脯氨酰4-羥化酶家族蛋白不同,該蛋白具有多功能性,并作為氧化還原酶參與二硫鍵的形成、斷裂和異構化。P4HB的活性受到嚴格調控。在催化過程中,二聚體的解離和底物的結合都可能增強其酶活性。

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一抗和二抗的區別:

第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合。

第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。

一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統產生免疫應答,由B細胞可以產生與相應抗原發生特異性結合的特殊蛋白質。

一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。

一抗:可以特異結合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。

二抗:可以和一抗結合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。

抗原抗體反應影響因素:

(一)反應物自身的因素

抗體:不同來源的抗體,反應性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應,為提高試驗的可靠性,應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應.

抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數目均可影響反應結果.顆粒性抗原出現凝集反應,可溶性抗原出現沉淀反應,單價抗原與相應抗體結合不出現沉淀現象.

(二)反應環境條件

酸堿度:抗原抗體反應必須在合適的pH環境中進行.蛋白質具有兩性電離性質,因此每種蛋白質都有固定的等電點.抗原抗體反應一般在pH6~9進行,有補體參與的反應pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應.

溫度:在一定范圍內,溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速.一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其的最適反應溫度要求.此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應.

電解質:抗原與抗體發生特異性結合后,雖由親水膠體變為疏水膠體,若溶液中無電解質參加,仍不出現可見反應.為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.

抗體的生活習性:

(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區別,就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。

(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。

(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與免疫應答。

(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。

(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。

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