詳細介紹
反應五要素:
牛白血病病毒(BLV)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
牛白血病病毒(BLV)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
牛白血病病毒(BLV)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
穿心蓮內酯英文名稱:AndrographolideCAS號:5508-58-7分子式:350.4492分子量:C20H30O5
2-甲酰咪唑分子式:96.09分子量: C4H4N2O英文名稱:2- aCAS號:10111-08-7
2,6-二溴-4-吡甲醛分子式:264.9分子量: C6H3Br2NO英文名稱:2,6- dibromo -4- pyridine formaldehydeCAS號:316800-46-1
性藍41英文名稱:Acid blue 41CAS號:2666-17-3分子式:487.46分子量: C23H18N3NaO6S
川芎嗪英文名稱:LigustrazineCAS號:1124-11-4分子式:136.19分子量:C8H12N2
(S,S)-2,2'-異亞丙雙(4--2-惡唑啉)分子式:334.42分子量: C21H22N2O2英文名稱:(S, S) -2,2'- isopropylidenebis (4- phenyl -2- oxazolinyl)CAS號:131457-46-0
十四烷氯吡分子式:311.93分子量: C19H34ClN英文名稱:Fourteen alkyl chlorideCAS號:2785-54-8
氯滴滴涕英文名稱:DDT chlorideCAS號:3563-45-9分子式:388.9379分子量:C14H8Cl6
乙聯分子式:182.26096分子量: C14H14英文名稱:Ethyl groupCAS號:40529-66-6
4-羥-4'-硝聯分子式:215.21分子量: C12H9NO3英文名稱:4- hydroxy -4'- nitro groupCAS號:3916-44-7
性紫17英文名稱:Acid violet 17CAS號:4129-84-4分子式:761.92分子量: C41H44N3NaO6S2
RARRES1/TIG1 視黃酸受體應答蛋白1抗體 0.1ml
GHDC GHDC蛋白抗體 0.2ml
phospho-c-Jun(Tyr170) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
NS5ATP9/KIAA0101 丙型肝炎病毒非結構蛋白5A反式激活蛋白9抗體 0.2ml
phospho-Bid(Ser61) 磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體 0.1ml
phospho-HRH1(Ser398) 磷酸化組胺受體H1抗體 0.1ml
AFAP/AFAP-110 微絲相關蛋白1抗體 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
phospho-Tau protein(Thr212) 磷酸化微管相關蛋白抗體 0.1ml
PEG10 肝癌高表達基因抗體 0.1ml
MMP-1 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml
RPL11/GIG34 細胞生長抑制蛋白34 0.2ml