詳細(xì)介紹
植物源性成分(RBCL)核酸檢測(cè)試劑盒圖片使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
植物源性成分(RBCL)核酸檢測(cè)試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
N,N-二甲乙酰胺(DMAC)英文名稱:N, N- two (DMAC)CAS號(hào):127-19-5分子式:87.12分子量: C4H9NO
耐性染色液英文名稱:Acid proof dyeing liquidCAS號(hào):分子式:分子量:
5--2-甲吡分子式:108.14292分子量: C6H8N2英文名稱:5- amino -2- methyl pyridineCAS號(hào):3430-14-6
三十六烷英文名稱:Thirty-six alkanesCAS號(hào):630-06-8分子式:506.97分子量: C36H74
3-三氟甲氧溴分子式:241.01分子量: C7H4BrF3O英文名稱:3- three - methoxy fluorideCAS號(hào):2252-44-0
五溴甲分子式:486.62分子量: C7H3Br5英文名稱:Five bromine tolueneCAS號(hào):87-83-2
N-乙-3-羥分子式:129.2分子量: C7H15NO英文名稱:N- -3- hydroxy ethyl piperidineCAS號(hào):13444-24-1
10-硝喜樹堿英文名稱:10- nitro groupCAS號(hào):104195-61-1分子式:393.3496分子量:C20H15N3O6
4,4'-雙(二乙氧膦-酰甲)-聯(lián)分子式:453.94分子量: (C6H4)2[CH2OP(OC2H5)2]英文名稱:4,4'- bis (two) - - - - - - -CAS號(hào):17919-34-5
丁氧分子式:150.22分子量: C10H14O英文名稱:ButoxybenzeneCAS號(hào):1126-79-0
丙酮酸鉀分子式:126.15分子量: C3H3KO3英文名稱:Potassium pyruvateCAS號(hào):4151-33-1
植物源性成分(RBCL)核酸檢測(cè)試劑盒圖片Rabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.1ml
phospho-B-Raf (Ser444) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
BCNG1/HCN1 腦環(huán)核苷酸門控通道蛋白1抗體 0.1ml
C3orf59/MB21D2 3號(hào)染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml
Calponin 1/2/3 鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體 0.2ml
GPS1/CSN1 G蛋白通路抑制蛋白1抗體 0.2ml
FLASH/CASP8AP2 半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
HIF-1β/ARNT1 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗體 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
Msx2/Hox8 同源盒基因Msx2抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。