詳細(xì)介紹
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒方法樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
反應(yīng)五要素:
轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
偶氮胂II英文名稱:Arsenazo IICAS號:3861-75-4分子式:分子量: C32H20As2N4Na4O2
牛蒡苷英文名稱:Niu BangganCAS號:20362-31-6分子式:534.55分子量:C27H34O11
5--2,4-二氟三氟甲分子式:197.11分子量: C7H4F5N英文名稱:5- amino -2,4- two f three fCAS號:261944-56-3
溴甲酚紫英文名稱:Bromocresol purpleCAS號:115-40-2分子式:540.24分子量: C21H16Br2O5S
磺胺醋酰分子式:214.24分子量: C8H10N2O3S英文名稱:SulphacetamideCAS號:144-80-9
溶劑紅48英文名稱:Solvent Red 48CAS號:13473-26-2分子式:785.67分子量: C20H4Br4Cl4O5
3-羥-2,4,6-*(HTBA)英文名稱:3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA)CAS號:53279-72-4分子式:515.81分子量: C7H3I3O3
間溴聯(lián)分子式:233.1分子量: C12H9Br;C6H5C6H4Br英文名稱:Inter - BrCAS號:2113-57-7
2-氟-4-氯甲分子式:144.57分子量: C7H6ClF英文名稱:2- -4- chlorideCAS號:452-75-5
4-氨甲分子式:187.11分子量: C6H16Cl2N2英文名稱:4- ammonia methyl piperidineCAS號:7144-05-0
硫鈷分子式:123.06分子量: CoS2英文名稱:Cobalt sulfideCAS號:12013-10-4
轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒方法Phospho-Btk(Ser180) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體 0.1ml
KCNK9/KCNK3 酸敏感鉀離子通道蛋白3抗體 0.1ml
C1orf144 1號染色體開放閱讀框144抗體 0.2ml
CKAP4 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1抗體 0.1ml
FBXL11 FBXL11蛋白抗體 0.2ml
DNAH10 軸絲動力蛋白10抗體 0.2ml
GCMA/GCM1 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體 0.2ml
C5ORF4 5號染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml