札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

聚乙英文名稱：PECAS號：9002-88-4分子式：分子量： [C2H4]n

萘酚AS-TR乙酯英文名稱：Naphthol AS-TR acetateCAS號：86875587分子式：分子量：

富勒C60(純)英文名稱：Fullerene C60 (pure)CAS號：99685-96-8分子式：720.66分子量： C60

癸二酰分子式：230.31分子量： C10H22N4O2英文名稱：Decyl two hydrazideCAS號：925-83-7

氟硅酸鉀分子式：220.27分子量： K2SiF6英文名稱：Potassium fluorideCAS號：16871-90-2

9-(3-溴)咔唑分子式：322.21分子量： C18H12BrN英文名稱：9- (3- Bromophenyl) carbazoleCAS號：185112-61-2

4-(4-溴胺)聯(lián)分子式：324.22分子量： C18H14BrN英文名稱：4- (4-)CAS號：1160294-93-8

8-溴喹哪分子式：222.09分子量： C10H8BrN英文名稱：8-, which isCAS號：61047-43-6

4--3-吡分子式：220.01分子量： C5H5IN2英文名稱：4- amino -3-CAS號：88511-27-7

甲紅英文名稱：Methyl redCAS號：493-52-7分子式：269.3分子量： C15H15N3O2；(CH3)2<

4-甲喹啉分子式：143.19分子量： C10H9N英文名稱：4- methyl groupCAS號：491-35-0

札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法Goat Anti-rabbit IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml

CD8  CD8抗體 0.1ml

phospho-PRKD1(Ser738)  磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 0.1ml

DOK1  D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體 0.1ml

OPN/BSP  骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人 0.1ml

CD22/BLCAM  B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22抗體 0.1ml

Bif  Bax相互作用因子1抗體 0.2ml

Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

SOD1/SOD  超氧化物歧化酶1抗體(銅/鋅過氧化物歧化酶SOD) 0.1ml

VEGF-C  血管內(nèi)皮生長因子C型抗體 0.1ml

Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518)  磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。