詳細介紹
產腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
產腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
產腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
4-溴-3-氟甲分子式:189.02分子量: C7H6BrF英文名稱:4- -3- fluorideCAS號:452-74-4
乙酰丙酮鈷(III)分子式:356.26分子量: C15H21CoO6英文名稱:Cobalt (III)CAS號:21679-46-9
甲氧蟲酰分子式:368.47分子量: C22H28N2O3英文名稱:A methyl oxygenCAS號:161050-58-4
2-氯-5-硝-4-甲吡分子式:172.57分子量: C6H5ClN2O2英文名稱:2- -5- nitro -4-CAS號:23056-33-9
2,5-二氯-3-硝吡分子式:192.98分子量: C5H2Cl2N2O2英文名稱:2,5- two -3- nitro pyridineCAS號:21427-62-3
蒽醌英文名稱:AnthraquinoneCAS號:84-65-1分子式:208.22分子量: C14H8O2
1,2,4,5-四溴分子式:393.7分子量: C6H2Br4英文名稱:Four - 1,2,4,5-CAS號:636-28-2
2,3-二-5-羧四唑氯物分子式:302.72分子量: C14H11ClN4O2英文名稱:2,3- two phenyl -5- fourCAS號:2118-40-3
2,5-二辛-1,4-二-1-丙炔分子式:378.63分子量: C28H42英文名稱:2,5- two -1,4- two -1- octyl propargyl benzeneCAS號:336625-80-0
環黃芪英文名稱:Ring of AstragalusCAS號:84605-18-5分子式:490.71分子量: C30H50O5
酞菁鈷(II)英文名稱:Cobalt phthalocyanine (II)CAS號:3317-67-7分子式:571.47分子量: C32H16CoN8
產腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法Ube2B 泛素激活酶2B抗體 0.2ml
Phospho-PSD93 (Tyr340) 磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 0.1ml
NIK/MAPKKK14 NFkB誘導激酶抗體 0.1ml
DBF4B/ASKL1 S期激酶活化蛋白DBF4B抗體 0.2ml
PGC1 beta 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml
Aurora A/ARK-1/AURKA 有絲分裂激酶A抗體 0.1ml
PAI1/PLANH1/Serpine 1 內皮細胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體 0.2ml
C20orf103 20號染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml
CAMKK2 鈣調蛋白激酶激酶β抗體 0.1ml
phospho-PIK3R1(Tyr467) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml
phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細絲蛋白A抗體 0.1ml
human serum 人血清抗體 0.2ml
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。