詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
2型脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-2)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
2型脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-2)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
2型脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-2)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
9-溴吖分子式:258.11332分子量: C13H8BrN英文名稱:9- bromide acridineCAS號(hào):4357-57-7
1,5-二硝萘分子式:218.17分子量: C10H6N2O4英文名稱:1,5- two nitro naphthaleneCAS號(hào):605-71-0
二氫丹參酮I英文名稱:Two h, ICAS號(hào):87205-99-0分子式:278.30196分子量:C18H14O3
乙龍腦酯英文名稱:Bornyl acetateCAS號(hào):20347-65-3分子式:196.29分子量:C12H20O2
2-己-6-吡分子式:分子量: C17H21N英文名稱:2- -6- cyclohexyl phenyl pyridineCAS號(hào):499158-97-3
4-(1H-吡唑-4-)-7-((2-(*硅烷)乙氧)-甲)-7H-吡咯并[2,3-D]嘧分子式:315.451分子量: C15H21N5OSi英文名稱:4- (1H-, -4-) -7- (2- (three methyl silicone alkyl) -) -7H- and [2,3-D]CAS號(hào):941685-27-4
氧蘇木精英文名稱:HaemateinCAS號(hào):475-25-2分子式:300.26分子量: C16H12O6
直接G英文名稱:Direct black GCAS號(hào):6428-31-5分子式:839.77062分子量: C34H27N13Na2O7
羊藿素英文名稱:HerbaCAS號(hào):737-52-0分子式:286.28分子量:C16H14O5
7--1-甲-1,2,3,4-四氫喹啉分子式:162.23分子量: C10H14N2英文名稱:7- amino -1- methyl -1,2,3,4- fourCAS號(hào):304690-94-6
枸櫞氯米芬英文名稱:Clomiphene citrateCAS號(hào):50-41-9分子式:598.08分子量:C32H36ClNO8
2型脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-2)核酸檢測試劑盒方法TPP1/CLN2 細(xì)胞生長抑制基因1蛋白抗體 0.2ml
Klotho Klotho多肽蛋白抗體 0.1ml
LDHC/Cancer,testis antigen 32 乳酸脫氫酶LDH-C(腫瘤/抗原32)抗體 0.1ml
gremlin 骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體 0.1ml
Gastrin receptor/GASR 促胃泌素受體抗體 0.1ml
MYL7 肌球蛋白輕鏈7抗體 0.2ml
Phospho-INPPL1(Tyr986/987) 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 0.1ml
RNF187 環(huán)指蛋白187抗體 0.2ml
phospho-MEK1/MAP2K1(Thr292) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
FAM84B/BCMP101 乳腺癌膜相關(guān)蛋白101抗體 0.2ml
KLK3/Prostate Specific Antigen 激肽釋放酶3/舒血管素3抗體 0.2ml
UGP2 尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗體 0.2ml