詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
2-溴-3-吡分子式:173.01分子量: C5H5BrN2英文名稱:2- -3- amino pyridineCAS號:39856-58-1
鈮鋯絲(棒)英文名稱:Niobium zirconium wire (rod)CAS號:分子式:分子量:
DMPO分子式:113.16分子量: C6H11NO英文名稱:DMPOCAS號:3317-61-1
α-倒捻子素英文名稱:Alpha mangostinCAS號:1551491分子式:410.45964分子量:C24H26O6
1,8-二萘分子式:158.2分子量: C10H10N2英文名稱:1,8- twoCAS號:479-27-6
2-三氟甲-5-溴吡分子式:226分子量: C6H3BrF3N英文名稱:2- three -5- bromideCAS號:436799-32-5
3-氯-2-砒分子式:143.57分子量: C5H6ClN3英文名稱:3- chloro -2- pyridine hydrazineCAS號:22841-92-5
甲橙英文名稱:Benzene methyl orangeCAS號:36402-77-4分子式:389.4分子量: C19H16N3NaO3S
正壬分子式:204.35分子量: C15H24英文名稱:Nonyl benzeneCAS號:1081-77-2
3--4-氯吡分子式:128.56分子量: C5H5ClN2英文名稱:3- amino -4-CAS號:20511-15-3
鈹試劑II英文名稱:Beryllium reagent IICAS號:51550-25-5分子式:738.52分子量: C20H10N2Na4O15
柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸檢測試劑盒圖片Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
Syntaxin 1A(brain) 突觸融合蛋白1抗體 0.1ml
MDFIC 肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體 0.2ml
GERP/TRIM8/RNF27 環(huán)指蛋白27抗體 0.2ml
Fumarate hydratase/FH 富馬酸水合酶抗體 0.2ml
AGPHD1 氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.2ml
phospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1抗體 0.1ml
BRRN1/CAPH 染色體相關(guān)蛋白H抗體 0.2ml
Mouse Anti-human IgG(3D3) 鼠抗人IgG單克隆抗體 1mg
Phospho-SIRT1(Ser47) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml
PAK4 p21激活激酶4抗體 0.1ml