詳細介紹
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
丁二酸二酰分子式:146.15分子量: C4H10N4O2英文名稱:Butyl succinate twoCAS號:4146-43-4
甲氧紅英文名稱:Oxygen redCAS號:68936-13-0分子式:278.74分子量: C13H15ClN4O
雙叔丁過氧異丙分子式:分子量:英文名稱:Double tert butyl peroxideCAS號:
2-氟-3-硝吡分子式:142.09分子量: C5H3FN2O2英文名稱:2- -3- nitro pyridineCAS號:1480-87-1
1,4-雙(2,2,2-三氟乙氧)分子式:274.16分子量: C10H8F6O2英文名稱:1,4- bis (2,2,2- three)CAS號:66300-61-6
N-(2-甲-5-硝)-4-(3-吡)-2-嘧胺分子式:307.31分子量: C16H13N5O2英文名稱:N- (2- methyl -5- nitro phenyl) -4- (3-) -2-CAS號:152460-09-8
諾孕美特英文名稱:NorgestometCAS號:25092-41-5分子式:372.55分子量: C23H32O4
鹽石蒜堿英文名稱:Red spider lily alkali hydrochloric acidCAS號:2188-68-3分子式:323.77142分子量:C16H18ClNO4
羥乙咪唑分子式:分子量:英文名稱:Hydroxyethyl imidazolineCAS號:
鹽溴己新英文名稱:Hydrochloric acid bromideCAS號:611-75-6分子式:412.59分子量: C14H21Br2ClN2
3-羥吡分子式:95.1分子量: C5H5NO英文名稱:3- hydroxy pyridineCAS號:109-00-2
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒方法Cystatin S 胱抑素S/半胱氨酸蛋白酶抑制劑S抗體 0.2ml
Rad51 Rad51抗體 0.1ml
NPY/Neuropeptide Y 神經肽Y抗體 0.1ml
phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2抗體 0.1ml
CEA/CD66e/CEACAM5 癌胚抗原抗體 0.1ml
Hrk/BCL2 interacting protein BCL2相互作用蛋白質抗體 0.2ml
PCDHA8 原鈣粘附蛋白α8抗體 0.2ml
CYP11B2 醛固酮合成酶CYP11B2抗體 0.2ml
Apelin/Apelin 13 脂肪炎癥因子Apelin抗體 0.1ml
PLAGL2 多形性腺瘤基因樣蛋白2抗體 0.2ml
PLEKHM2/SKIP 血小板白細胞C激酶底物同源結構域M2抗體 0.2ml
IGFBP2 胰島素樣生長因子結合蛋白2抗體 0.1ml
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。