詳細介紹
反應五要素:
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
人腎成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
NZYM肉湯/NZYM BrothBR100克國產(chǎn)/進口
人膠質(zhì)母細胞瘤細胞英文名稱:A172
復達欣/孢他啶/孢他定/孢噻甲羧肟/孢塔齊定/噻甲酸肟孢菌素/凱復定/Ceftazidime添加于100mlHB41553毫克/支×5國產(chǎn)/進口
黃芪甲苷規(guī)格:100mg/支;98%
卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/Lecithin Tween 80 Nutrient Agar妝品檢驗中細菌計數(shù)250克國產(chǎn)/進口
Tris(三羥甲基氨基甲烷)500g國產(chǎn)
胰酶細胞消液規(guī)格:100ml
麥芽浸膏/麥芽浸汁/麥精/Malt extractBR100克國產(chǎn)/進口
K-562(人慢性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2
負鼠腎細胞英文名稱:OK
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測試劑盒品牌FLIP/c FLIP 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/FITC FITC標記的兔抗小鼠IgG 0.3ml
Goat Anti-human IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗人IgG 0.1ml
phospho-SYN1(Ser9) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
VEGF-A 血管內(nèi)皮生長因子A 0.1ml
Testis 腫瘤抑制基因Testin抗體 0.2ml
phgophs-ATG4C(Ser177) 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體 0.1ml
AEV polyprotein 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 0.1ml
IQCK IQCK蛋白抗體 0.2ml
Defensin β2/DEFB2/HBD-2 防御素β2抗體 0.1ml
Goat Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Slc4a7/Nbcn1 氫鈉協(xié)同轉運蛋白4-A7抗體 0.2ml