詳細(xì)介紹
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:3T3A31
A875/黑色素瘤細(xì)胞株國產(chǎn)
胎兒真成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
3.5%鈉三糖鐵瓊脂/3.5% NaC1 TSI Agar副溶血弧菌生試驗(yàn)鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
ONPG發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
人甲狀腺濾泡上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Frey Medium Modified Base250克國產(chǎn)/進(jìn)口
黑色素瘤英文名稱:B16瘤
真菌培養(yǎng)基/霉菌培養(yǎng)基/Mould Medium用于無菌試驗(yàn)及真菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒品牌ABCA7 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7抗體 0.2ml
NALP4 癌/抗原58抗體 0.2ml
SSTR2 生長抑素受體2抗體 0.1ml
phospho-Claudin 6(Tyr219) 磷酸化緊密連接蛋白6抗體 0.1ml
AMSH 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
TNFRSF19 腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
GPD2 線粒體甘油三磷酸脫氫酶2抗體 0.2ml
Intra Acrosomal Protein/SP10 頂端體蛋白10抗體 0.2ml
RAC2 G蛋白P21 RAC2抗體 0.2ml
Plakophilin 2 橋粒斑菲素蛋白2抗體 0.2ml
KCNE1 鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。