詳細介紹
反應(yīng)五要素:
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
匹克氏肉湯基礎(chǔ)B/Pick,s Broth Base B一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠成年表角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基100mL
小麥胚芽粉/Wheat gern powderBR500克國產(chǎn)/進口
SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
OVCAR-3(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2gersion
HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231(ATCC來源), 人腺細胞
LoVo(人大腸細胞)5×106cells/瓶×2
HFF-1(人包成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
769-P(人腎細胞腺細胞)5×106cells/瓶×2
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢RNASE4/Angiogenin 血管生成素核糖核酸酶4抗體(肌萎縮性側(cè)索硬化癥蛋白) 0.1ml
Kazrin Kazrin蛋白抗體 0.2ml
IL-6 白介素6抗體 0.1ml
SLC27A6/ACSVL2 脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白6抗體 0.2ml
GST tag/GSTM1 GST標(biāo)簽蛋白抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗牛IgG 0.1ml
CLCN3/CLC-3 氯離子通道蛋白3抗體 0.2ml
C21ORF62 21號染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml
RASAL1 RAS蛋白樣激活劑1抗體 0.2ml
p55/DCAF1 染色質(zhì)組裝因子1P55抗體 0.2ml
phospho-Pyk2/PTK2B(Tyr402) 磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體 0.1ml