詳細介紹
反應五要素:
尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
人腺細胞英文名稱:MDA-MB-468
UACC-812(人腺導管瘤細胞)5×106cells/瓶×2
16HBE(人支氣管上樣細胞)5×106cells/瓶×2
新生兒表角細胞*培養基100mL
C2C12(小鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細胞英文名稱:Hepa 1-6
麥角甾苷規格:1g/支;98%
人牙周膜成纖維細胞*培養基100mL
HC瓊脂基礎/HC Agar Base妝品中霉菌總數測定250克國產/進口
人胚肺成纖維樣細胞英文名稱:KMB
YT瓊脂/YT AgarBR250克國產/進口
尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌C11ORF67/PTD015 11號染色體開放閱讀框67抗體 0.2ml
IFN-β 干擾素β抗體 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/Gold 膠體金標記的驢抗人IgG 0.5ml
E.coli O157:H7 腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 0.2ml
AGFG2 HIV-1病毒復制結合蛋白2抗體 0.2ml
EB3 微管相關蛋白EB家族3抗體 0.2ml
THSD1 血小板跨膜反應蛋白1抗體 0.2ml
Endothelial lipase 內皮脂肪酶抗體 0.2ml
SCGB3A1 結合珠蛋白家族3A1抗體 0.2ml
Histone H3 (tri methyl K36) *基化組蛋白H3抗體 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗雞IgG 0.1ml