詳細介紹
猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
One Step Western Kit HRP (Rabbit)/一步法快速WB(HRP)試劑盒(兔)50次2次、10次、50次gersion
H-97(人高轉移肝細胞)5×106cells/瓶×2
MCF全細胞裂解液100μg100μg
Li-7(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
Hep-2, 人喉細胞系
22RV1(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
CNE1, 人鼻咽細胞系
小鼠巨噬細胞英文名稱:Ana-1
801-D (人巨細胞性肺細胞)5×106cells/瓶×2
人子宮平滑肌細胞*培養基100mL
BDS培養基/BDS Medium擬桿菌的分離培養250克國產/進口
猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒品牌RNF123 環指蛋白123抗體 0.2ml
EphA2/Eph receptor A2 內皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶抗體 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關蛋白2抗體 0.1ml
Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
MMP-9 基質金屬蛋白酶-9抗體 0.1ml
A2BP1/Fox1 共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體 0.2ml
C6orf1 6號染色體開放閱讀框1抗體 0.2ml
Angiomotin 血管抑素結合蛋白抗體 0.2ml
Ubiquityl Histone H2A.X (Lys119) 泛素化組蛋白H2AX抗體 0.2ml
CYLD 微管結合蛋白CYLD抗體 0.1ml
SCEL SCEL蛋白抗體 0.2ml
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。