詳細介紹
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產品名稱 | 非大提柱式植物 DNAout4次圖片 |
規格 | 100mL |
價格 | 電詢 |
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1、RNA純化系列產品
2、DNA純化系列產品
3、電泳及回收系列產品
4、探針標記及檢測系列產品
5、核酸擴增系列產品
6、克隆表達系列產品
7、基因組研究系列產品
8、蛋白質研究系列產品
9、細胞生物學研究系列產品
10、即用型溶液、質粒庫、菌種庫等等
非大提柱式植物 DNAout4次圖片的詳細介紹:
非大提柱式植物 DNAout4次圖片NA提取流程圖:
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
稱答:非大提柱式植物 DNAout4次圖片回收得到的DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長段回收時應注意哪些問題?
答:當DNA段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
非大提柱式植物 DNAout4次圖片注意事項:
●溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 段可直接用于各種酶促反應等,不會影響后續試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。丁香酸 530-57-4
特戊酸碘甲酯 53064-79-2
5-氯-2-甲基苯酚 5306-98-9
2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-羧酸 53137-27-2
雌酚酮 53-16-7
二苯酮縮亞胺鹽酸鹽/二苯甲酮亞胺鹽酸鹽 5319-67-5
N-芐 5321-63-1
5-氨基-2-甲氧基-3-溴吡啶 53242-18-5
2-溴乙基膦酸二乙酯 5324-30-1
N-BOC-氨基環己胺羧酸 53292-89-0
三氨基胍鹽酸鹽 5329-29-3
4-溴丙烯酸酯 5332/6/9
3-溴喹啉 5332-24-1 CT-1/CTF1 心肌營養素1抗體
CLEC2/CLEC1B C型凝集素結構域家族1成員B抗體
CATSPERB 陽離子通道精子相關蛋白β亞基抗體
CEP57 睪丸特異性蛋白57抗體
CD62L L選擇素抗體
CD53 CD53抗體
CED6 細胞死亡同源蛋白6抗體
CLCNKB 氯離子通道KB抗體
CLEC12A C型凝集素結構域家族12成員A抗體
CLIC2 氯離子通道蛋白2抗體
CLEC9A C型凝集素結構域家族9成員A抗體
CLEC9A C型凝集素結構域家族9成員A抗體
CDH12 腦鈣粘蛋白12抗體
Cadherin 20 鈣粘蛋白20抗體
CDH29 鈣粘蛋白29抗體
CD200R CD200受體抗體
Cadherin 26 鈣粘蛋白26抗體
CDHF14 鈣粘蛋白14抗體
CLCA3 鈣激活氯離子通道蛋白3抗體
2-辛基十二醇 5333-42-6
2,3-環戊烯并吡啶 533-37-9
非大提柱式植物 DNAout4次圖片3-甲基-4-硝基吡唑 5334-39-4
2-脫氧-D-核糖 533-67-5
3-(三氟甲氧基) 50823-91-1
操作步驟:
1 非大提柱式植物 DNAout4次圖片切取含有目的DNA段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
● 切膠時,請使用長波長UV (360 nm )光盒。且不要將DNA 長時間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2 稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
● 凝膠重量的稱量方法:取1.5 ml 離心管電子天平稱初質量,切膠裝在離心管后稱終質量,兩者差即為膠的質量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個離心管的重量需單獨稱量。
3 按照每100 mg 瓊脂糖凝膠對應100 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-10min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴重影響DN段的回收效率。
● 如果總體積大于500 µl,可適當增加溶膠時間。
● 若此時溶液變紅,可加10 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因為純化柱在較高溫度時結合DNA 的能力較弱。
6 12,000 rpm 離心1min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
● 此時DNA 片段被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按1: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質洗脫,以獲得高質量DNA 片段。
9 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液。
10 12,000 rpm 離心 3min ,以*去除純化柱中的液體。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DNA 片段的充分溶解。
11 將離心柱置于新的1.5 ml 離心管中。向純化柱的中央處,懸空滴加30-100 µl 溶液Eluent (60℃預熱),靜置2min 。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DNA 片段。貯存于-20℃。
● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的片段的多少、用戶對目的片段濃度要求而定。
● 對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA 目的片段的產量。CD200R CD200受體抗體
CELA1 彈性蛋白酶1抗體
c-Kit 干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原抗體抗體
CD99L2 CD99樣蛋白2抗體
CTNNA3 鈣粘蛋白相關蛋白CTNNA3抗體
Claudin 15 緊密連接蛋白15抗體
Claudin 12 緊密連接蛋白12抗體
CHIC2 CHIC2蛋白抗體
phospho-CHEK1 磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體
Phospho-CHK2 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體
Phospho-CHK2 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體