詳細介紹
即用型高保真PCR試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
即用型高保真PCR試劑盒 | 1.5mL | GOY-P4021 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
特點 :
本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分。現代食品加工工藝改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質地等特性,因此傳統的感官鑒別技術已經無法對食材的真偽進行準確的鑒定。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術將對食品監管和安全提供重要的保障。本產品就是為滿足這一需求根據 PCR 原理開發的產品,它具有下列特點:
1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。
2. 根據大豆熱休克蛋白基因保守區域設計引物,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分。
3. 快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。
4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設備。
5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規 PCR。
特點優勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
natural resistance-associated macrophage protein 2,NRAMP2 ELISA kit雞ACTH elisa檢測試劑盒Xanthyletin
natural resistance-associated macrophage protein 1,NRAMP-1 ELISA kit雞ACV-A elisa檢測試劑盒Diversoside
activating transcription factor-1,ATF-1 ELISA Kit雞ACV-AB elisa檢測試劑盒Chalepensin
SOX5 ELISA Kit雞ACV-B elisa檢測試劑盒Hydramicromelin D
SOX4 ELISA Kit雞ADM elisa檢測試劑盒7-Prenyloxycoumarin
TGFBR3 ELISA Kit雞ALT elisa檢測試劑盒Ammajin
transforming growth factor β receptor 2,TGF-βR2 ELISA kit雞AmAC-1 elisa檢測試劑盒Hydramicromelin B
TGFBR1 ELISA Kit雞ANG-Ⅰ elisa檢測試劑盒Demethylluvangetin
TSC22 ELISA Kit雞ANG-Ⅱ elisa檢測試劑盒3-(1,1-Dimethylallyl)-8-hydroxy-7-methoxycoumarin
Transforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit雞AP-1 elisa檢測試劑盒Matsukaze-lactone
TGF β2 ELISA Kit雞AST elisa檢測試劑盒5,6,7-Trimethoxycoumarin
TGF-β1 ELISA kit雞AT-Ⅲ elisa檢測試劑盒Thamnosmonin
TGF-α ELISA Kit雞ATGL elisa檢測試劑盒Hymexelsin
transglutaminase 2C polypeptide,TGM2 ELISA Kit雞BF elisa檢測試劑盒6′′-O-β-D-Apiofuranosylapterin
HLA-DQA2 ELISA Kit雞bFGF elisa檢測試劑盒6-(3-Methyl-2-oxobutyroyl)-7-methoxycoumarin
Cyclin Dependent Kinase 5,CDK5 ELISA Kit雞BSA elisa檢測試劑盒6-Hydroxycoumurrayin
即用型高保真PCR試劑盒RPS6KB1(Ser441+Thr444) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規格 0.1ml
RPS6KB1(Ser434) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規格 0.1ml
RPS6KB1(Ser427) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規格 0.1ml
RPS6KB1(Ser421) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規格 0.1ml
RPS6KB1(Ser417) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規格 0.1ml
RPS6KA1(Thr359) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體規格 0.1ml
RPS6KA1(Thr348) 磷酸化磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體規格 0.1ml
使用方法:
注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1.樣本處理(樣本處理區)
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區)
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區。
2.加樣(樣本處理區)
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區。