詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠小腸黏膜上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0861 |
商品介紹:
名稱 小鼠小腸黏膜上皮細胞 2.組織來源:小腸組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠小腸黏膜上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠小腸黏膜上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M045 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 IFNE 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNA4 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNA13 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNA14 基因全長ORF克隆
小鼠 BLMH 基因全長ORF克隆
小鼠 IFRD1 基因全長ORF克隆
小鼠 IFRD2 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNGR2 基因全長ORF克隆
小鼠 HTR2B 基因全長ORF克隆
小鼠 ENPP2 轉錄變體2 基因全長ORF克隆
小鼠小腸黏膜上皮細胞0.156-10 ng/mL 人酰基轉移(LCAT)Elisa試劑盒
BG11培養基 英文名稱:BG11 Medium 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL 人CC趨化因子受體3(CCR-3)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人鈣粘素3(Cadherin-3)ELISA試劑盒
0.78-50 mIU/mL 人血小板解整合素樣金屬蛋白20(ADAMTS20)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人酪蛋白激II亞基alpha'ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人白介素1α(IL-1α )ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Lipoxin A4
1.56-100 ng/mL 人前列腺素G/H合成2(PTGS2)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)