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小鼠前列腺平滑肌細胞

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更新時間:2022-04-22 14:47:15瀏覽次數:294

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X1237 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
小鼠前列腺平滑肌細胞的相關*:組織VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒定性檢測試劑盒 20次
體液VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒定性檢測試劑盒 20次
通用型VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 20次
細胞VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 20次
組織VZV(VARICELLA ZOS

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

小鼠前列腺平滑肌細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1237

商品介紹:

名稱    小鼠前列腺平滑肌細胞 

2.組織來源:前列腺

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠前列腺平滑肌細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性*的性腺器官;前列腺是不成對的實質性器宮,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分;作為內分泌腺,前列腺分泌的激素稱為前列腺素"。前列腺平滑肌細胞是前列腺的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。前列腺平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠前列腺平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的小鼠前列腺平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-M184

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 EphA3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 SerpinE1 / PAI-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 FSTL1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 IFNA5 / IFNaG 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 EphA3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 CGB5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠前列腺平滑肌細胞Bullera mrakii喋呤檢測試劑盒

Debaryomyces hansenii甲基化CpG結合蛋白2檢測試劑盒

Cryptococcus pseudolongus甲殼質蛋白40檢測試劑盒

Bullera variabilis甲硫亞砜還原B1檢測試劑盒

Cryptococcus sp.甲胎蛋白檢測試劑盒

Bullera oryzae甲胎蛋白異質體3檢測試劑盒

Bullera sp.甲肟前列腺素D2檢測試劑盒

Cryptococcus victoriae甲狀旁腺素檢測試劑盒

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