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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠心肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0947 |
商品介紹：
名稱 小鼠心肌細胞 2.組織來源：心臟組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠心肌細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀；細胞培養2h后開始貼壁，呈梭形；到12h左右，細胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細胞分離培養48h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細胞會出現搏動；心肌細胞為終末分化細胞，在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點，并具有自發性節律搏動，且心肌細胞的培養具有簡便、定量、重復性好以及不受神經體液因素的影響等特點。利用培養的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節，研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景，對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠心肌細胞采用膠原酶-胰酶聯合消化法結合差速貼壁法，并用化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠心肌細胞經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M073 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 GPX3 基因全長ORF克隆
大鼠 CYP4A3 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC25A17 基因全長ORF克隆
大鼠 SERPINB3A 基因全長ORF克隆
大鼠 RASSF7 基因全長ORF克隆
大鼠 FAH 基因全長ORF克隆
大鼠 GLB1 基因全長ORF克隆
大鼠 NOB1 基因全長ORF克隆
大鼠 HMGCS2 基因全長ORF克隆
大鼠 FGA 基因全長ORF克隆
小鼠心肌細胞78-5000 pg/mL 人受體2(FOLR2)ELISA試劑盒
BCYE瓊脂基礎 英文名稱：BCYE Agar Base 產品規格：100g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 1
雙歧桿菌培養基 英文名稱：Bifidobacterium Medium 產品規格：250g
0.47-30 nmol/L 人賴氨酰氧化樣蛋白3(LOXL3)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/ml 人觸珠蛋白相關蛋白ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人脂質轉運蛋白(CETP)ELISA試劑盒
液體大豆酪蛋白消化物培養基 英文名稱：SoybeanCasein Digest Medium 產品規格：250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Microfibrillar-associated protein 5x
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