詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠下腔靜脈內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1361 |
商品介紹:
名稱 小鼠下腔靜脈內皮細胞 2.組織來源:下腔靜脈組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠下腔靜脈內皮細胞分離自下腔靜脈組織;下腔靜脈是體內最大的靜脈,收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成,匯合部位多在第5腰椎水平,少數平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方,沿腹主動脈的右側上行,經肝的腔靜脈溝、穿 膈的腔靜脈孔,開口于右心房。下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動脈及小腸系膜根越過。后面為有膈腳、第1~4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支。右側與 腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰,左側為腹主動脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈,其中大部分 屬支與同名動脈伴行。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠下腔靜脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠下腔靜脈內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M235 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 JAM-A / F11R 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 HER4 / ErbB4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL7R / IL7RA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL27 / Interleukin-27 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠下腔靜脈內皮細胞Corynebacterium ammoniagenes二酰基甘油檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes繁殖與呼吸綜合征病抗體檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes芳香化檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes芳香烴受體檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes非酯化脂肪酸檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes肺表面活性物質相關蛋白A檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes肺表面活性物質相關蛋白C檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes肺表面活性物質相關蛋白D檢測試劑盒