化工儀器網
詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠毛囊細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1005 |
商品介紹：
名稱 小鼠毛囊細胞 2.組織來源：毛囊組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠毛囊細胞分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細胞連續形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭，中心是一根毛發，立毛肌的一側斜附在毛囊壁上，附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結構比較復雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。毛囊開口起始于皮膚表面，而每個毛囊又和一個或多個腺胞相連。每個腺胞解離成富含脂質的物質，卻又通過一個共同和毛囊相通連的皮脂腺導管將分泌物運送到皮膚表面排出。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠毛囊細胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠毛囊細胞經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M095 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 CD247 基因全長ORF克隆
食蟹猴 LAMP3 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD226 基因全長ORF克隆
食蟹猴 PRNP 基因全長ORF克隆
食蟹猴 TSPAN7 基因全長ORF克隆
食蟹猴 ENPP3 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CCR7 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CXCR5 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CCR9 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CXCR3 基因全長ORF克隆
小鼠毛囊細胞0.312-20 ng/mL 人轉谷氨酰胺2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒
瓊脂培養基S 英文名稱：Agar medium S(R2A) 產品規格：250g
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Leukotriene C4 synthase
0.78-50 ng/mL 人胎盤蛋白13(PPL13)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人基質金屬蛋白1(MMP-1)ELISA試劑盒
6.25-400 U/mL ELISA Kit for Human Non-secretory ribonuclease
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12
6.25-400 pg/mL ELISA Kit for Human Somatostatin
1.56-100 ng/mL 人CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
化工儀器網