詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠嗅鞘細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1045 |
商品介紹:
名稱 小鼠嗅鞘細胞 2.組織來源:嗅球組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠嗅鞘細胞分離自嗅球組織;嗅鞘細胞(OECs)是在功能上介于施旺細胞和少突膠質細胞之間的一種特殊的膠質細胞,具有神經營養、抑制膠質增生、瘢痕形成、成鞘作用等;為軸突生長提供了適宜的微環境及較強的遷移的特性,使其成為促進中樞神經再生的理想候選細胞之一。嗅鞘細胞是目前所發現的極少數的中樞神經系統可以再生細胞之一,其特點為終身具有神經再生功能,還能夠釋放多種神經營養因子、神經粘附分子。被認為是髓鞘化能力*的膠質細胞,逐漸用于治療脊髓損傷。嗅鞘細胞與膠質細胞、雪旺細胞在表現型上有共同點,它們都能促進軸突的再生,主要區別在于嗅鞘細胞不但存在于中樞神經系統,也存在于外周神經中。嗅鞘細胞被認為是一種可塑性很高的細胞,它可表現出多種細胞形態和細胞表面標志,在嗅系統發育過程中,嗅鞘細胞根據其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可標記大部分在體嗅鞘細胞,然而在嗅球外神經層O4陽性嗅鞘細胞仍然可以在P75NTR陽性細胞層內分化成E-NCAM陽性的細胞層,還有一定比率的嗅鞘細胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽性。嗅黏膜中的神經元是生后才生長并在成年時繼續分化的神經元,壽命為4-12周,隨著新細胞的生長,又建立了新的神經支配關系。嗅鞘細胞存在于嗅神經及嗅球的神經層上,沿嗅神經的全長,從周圍神經系統到中樞神經分布。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠嗅鞘細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法、結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠嗅鞘細胞經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M113 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CLEC1A 基因全長ORF克隆
大鼠 CLEC14A 基因全長ORF克隆
大鼠 CLEC10A 基因全長ORF克隆
大鼠 CD69 基因全長ORF克隆
大鼠 FCER2 基因全長ORF克隆
大鼠 CD93 基因全長ORF克隆
大鼠 EDA2R 基因全長ORF克隆
大鼠 IFNA5 基因全長ORF克隆
大鼠 IL13RA2 基因全長ORF克隆
大鼠 IL22RA2 基因全長ORF克隆
小鼠嗅鞘細胞0.78-50 ng/mL 人妊娠特異性β1糖蛋白11(PSBG-11)ELISA試劑盒
根瘤菌培養基 英文名稱: 產品規格:250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Pro-interleukin-16
不*瓊脂培養基 英文名稱:Incomplete Agar Medium 產品規格:250g
1.56-100 ng/mL 人胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人轉錄因子Maf(Transcription factor Maf)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Multidrug resistance-associated protein 9
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sphingosine 1-phosphate receptor 3
乳糖-雙岐桿菌鑒定 英文名稱: 產品規格:20支