詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
胃癌組織源細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1115 |
商品介紹:
名稱 胃癌組織源細胞 2.組織來源:胃癌組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人胃癌組織源細胞分離自胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,在我國各種惡性腫瘤中發病率居,胃癌發病有明顯的地域性差別,在我國的西北與東部沿海地區胃癌發病率比南方地區明顯為高。好發年齡在50歲以上,男女發病率之比為2:1。由于飲食結構的改變、工作壓力增大以及幽門螺桿菌的感染等原因,使得胃癌呈現年輕化傾向。胃癌可發生于胃的任何部位,其中半數以上發生于胃竇部,胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累。絕大多數胃癌屬于腺癌,早期無明顯癥狀,或出現上腹不適、噯氣等非特異性癥狀,常與胃炎、胃潰瘍等胃慢性疾病癥狀相似,易被忽略,因此,目前我國胃癌的早期診斷率仍較低。 5.方法簡介: 實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人胃癌組織源細胞經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H139 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
FAP 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
TROP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
TRAILR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
CD95 / Fas 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
CD166 / ALCAM 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
APCDD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
UNC5B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
JAK3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
PTPRC 轉錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
胃癌組織源細胞瓊脂培養基C 英文名稱:Agar medium C 產品規格:250g
3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human Neuroglobin
0.312-20 ng/mL 病毒H9亞型(AIV-H9)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-X-C chemokine receptor type 3
0.156-10 ng/mL 人/谷轉運體(XCT)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Metallothionein-1A
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human C-Peptide
淀粉-雙岐桿菌鑒定 英文名稱: 產品規格:20支
0.156-10 ng/mL 人N糖基化/DNA裂解(OGG1)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人細胞結合蛋白2(CRABP2)ELISA試劑盒