詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
乳腺癌血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1201 |
商品介紹:
名稱 乳腺癌血管內皮細胞 2.組織來源:乳腺癌組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人乳腺癌血管內皮細胞分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織;女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,乳腺癌是發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發生在女性,男性僅占1%。乳腺并不是維持機體生命活動的重要器官,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性,細胞之間連接松散,容易脫落。癌細胞一旦脫落,游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉移,危及生命。目前,乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。 5.方法簡介: 實驗室分離的人乳腺癌血管內皮細胞采用胰-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人乳腺癌血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H171 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RIPK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
VEGFA 轉錄變體4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
VEGFA 轉錄變體4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
IL2RG 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
INHBA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
TRAILR1 / TNFRSF10A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
BACE1 轉錄變體a 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
乳腺癌血管內皮細胞兔子可溶性血管內皮蛋白C受體Anti-MyD88 Antibody人胃泌素抑制肽(GIP)elisa定量檢測試劑盒
兔脂蛋白αAnti-MYH14 Antibody人基質金屬蛋白23B(MMP23B)elisa定量檢測試劑盒
小鼠肺部活化調節趨化因子Anti-MYH11 Antibody人角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)elisa定量檢測試劑盒
植物鈣調素Anti-MYH14 Antibody人纖維介素蛋白(FGL2)elisa定量檢測試劑盒
人穿孔素/成孔蛋白Anti-MYL6 Antibody人TERF1相互作用核因子2(TINF2)elisa定量檢測試劑盒
大鼠膽固Anti-MYH4 Antibody人腎小球組織糖基化終末產物(GTEAGE)elisa定量檢測試劑盒
人多效生長因子Anti-MYL7 Antibody人纖α(FGα)elisa定量檢測試劑盒
兔載脂蛋白EAnti-MYL9 Antibody人酰基化饑餓素(A-GHRL) elisa定量檢測試劑盒