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大鼠小腦顆粒細胞

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更新時間:2022-04-19 16:26:59瀏覽次數:329

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X1043 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
大鼠小腦顆粒細胞的相關*:體液腺苷酸環化(Adenylate Cyclase)活性連續循環比色法定量檢測試劑盒 20次
細胞腺苷酸環化(Adenylate Cyclase)活性熒光定量檢測試劑盒 20次
組織腺苷酸環化(Adenylate Cyclase)活性熒光定量檢測試劑盒 20次
體液腺苷酸環化(Adenylate Cyclase)活性熒光定量檢測試劑盒 20次
動物細胞鈉/鉀

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

大鼠小腦顆粒細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1043

商品介紹:

名稱    大鼠小腦顆粒細胞 

2.組織來源:腦組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織;神經元是神經系統最基本的結構與功能單位,小腦顆粒神經元是體積較小的神經元,直徑約10μm,在中樞神經系統中含量非常豐富,近乎神經元數量的一半。由于小腦神經元的生長、分化和大腦皮層神經元相似,而且數量多、便于取材,因此小腦顆粒神經元是研究神經元生長發育、神經軸突再生及神經疾病發生機制和臨床神經藥理的重要手段。小腦顆粒神經元是小腦主要的中間神經元,在哺乳動物的小腦內數量最為豐富。顆粒神經元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯系,形成小腦皮層內的神經元環路,在小腦的神經活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經元,導致小腦皮層的神經元環路受損,從而呈現神經性行為失調。研究小腦顆粒神經元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發生的機理特別是分子機理,有賴于小腦顆粒神經元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導,這是小腦功能理論中的關鍵假設,小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞NSE免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養基含B-27Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-R112

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態神經元細胞樣

傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

IL5 基因全長ORF克隆

IL1B 基因全長ORF克隆

IL1A 基因全長ORF克隆

IL21 基因全長ORF克隆

IL6 基因全長ORF克隆

IL2 基因全長ORF克隆

大鼠 IL20Ra 基因全長ORF克隆

食蟹猴 CD3E 基因全長ORF克隆

大鼠 LAMP1 基因全長ORF克隆

大鼠 KIRREL3 基因全長ORF克隆

大鼠小腦顆粒細胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Sorting nexin-1

1.56-100 IU/mL 人1(PRM1)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 29

腸毒素產毒培養基 英文名稱:Enterotoxin toxin-producing medium 產品規格:250g

醇類中和劑管 英文名稱: 產品規格:9ml*20

0.156-10 ng/mL 人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL 前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Roundabout homolog 4

-尼氏染色液 英文名稱: 產品規格:5ml*6

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