詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
睪丸支持細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0913 |
商品介紹:
名稱 睪丸支持細胞 2.組織來源:睪丸組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人睪丸支持細胞分離自睪丸;睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞,在體內呈不規則的高錐體形,細胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架,為其提供必需的營養物質,能合成與分泌雄激素結合蛋白,為其提供高濃度的雄激素環境等,還具有構成血-睪屏障,形成睪丸內微環境,調節發生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞,能分泌多種生長因子和免疫抑制因子,不僅可為提供營養支持和免疫保護,也能對其他細胞,如胰島和神經細胞提供營養支持,而且當其與胰島或神經細胞共移植時,也能夠為這些細胞提供免疫保護,提高植活率。因此,睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎研究有重要價值,而且在發生等領域有重要意義。 5.方法簡介: 實驗室分離的人睪丸支持細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人睪丸支持細胞經Fas-L免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H060 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 MBL1 基因全長ORF克隆
小鼠 B7-2 / CD86 基因全長ORF克隆
小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 基因全長ORF克隆
小鼠 Serpinb10 基因全長ORF克隆
小鼠 CTLA4 基因全長ORF克隆
小鼠 CADM3 基因全長ORF克隆
小鼠 KNG1 轉錄變體3 基因全長ORF克隆
小鼠 JAM3 基因全長ORF克隆
小鼠 JAM2 基因全長ORF克隆
小鼠 PRLR 基因全長ORF克隆
睪丸支持細胞15.6-1000 pg/mL 人蛋白S100-A4(Protein S100-A4)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 番茄特定基因序列(PG)核酸檢測試劑盒
0.156-10 ng/mL 人骨形態形成蛋白拮抗蛋白2(GREM2)ELISA試劑盒
氯化鈉B肉湯基礎(SCPB) 英文名稱:Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 產品規格:250g
0.312-20 ng/mL 木瓜特定基因序列(Papaya)核酸檢測試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人血管動蛋白樣1(AMOTL-1)ELISA試劑盒
堿性蛋白胨水管(10ml) 英文名稱:Alkaline peptone water 產品規格:10ml*20
3%過氧化氫試劑 英文名稱: 產品規格:2ml*20支
水楊苷發酵管 英文名稱: 產品規格:20支
BPLS瓊脂 英文名稱:BPLS Agar 產品規格:250g