詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小氣道上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0725 |
商品介紹:
名稱 小氣道上皮細胞 2.組織來源:小氣道組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人小氣道上皮細胞分離自小氣道;臨床上通常將內徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,但易阻塞的特點。在平靜吸氣時,空氣進入狹窄的鼻咽部,產生渦流。由于小氣道已無軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,管腔通暢性不象軟骨性氣道,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續呼吸道內層,作為隔絕外界有害物質的物理和功能屏障發揮著*的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細胞在功能上能夠調節免疫反應、產生化學因子進行宿主防御、表達粘附分子,并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原;它們還能產生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞;小氣道上皮細胞的培養可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道的生理功能特點:①小氣道阻力小;②氣流速度慢;③可調節控制通氣與血流比例。 5.方法簡介: 實驗室分離的人小氣道上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人小氣道上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H010 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CCNB2 基因全長ORF克隆
TIGIT / VSTM3 基因全長ORF克隆
CCNH 基因全長ORF克隆
CDH16 基因全長ORF克隆
CCNC 基因全長ORF克隆
OSTM1 基因全長ORF克隆
HIST2H4A 基因全長ORF克隆
FGF21 基因全長ORF克隆
CCNB1 基因全長ORF克隆
TDGF1 基因全長ORF克隆
小氣道上皮細胞1.25-80 ng/mL ELISA Kit for Human Involucrin
15.6-1000 pg/mL 登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
牛津瓊脂(OXA)平板(9cm) 英文名稱:Oxford Agar Base 產品規格:10個/包
C.L.E.D培養基 英文名稱:C.L.E.D Medium 產品規格:250g
0.78-50 ng/mL 腸道腺病毒(EADV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.625-40 ng/mL 人脯氨酰4羥化亞基α1(4-PH alpha-1)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人酰基氨基酸釋放(AARE)ELISA試劑盒
TM培養基 英文名稱:Thayer Martin Agar 產品規格:250g
抗生素檢定培養基5號 英文名稱:Antibiotic No.5(PH8.0) 產品規格:250g
Campy-Cefex添加劑 英文名稱:Campy-Cefex Supplement 產品規格:2ml*5