詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠皮膚肥大細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0991 |
商品介紹:
名稱 大鼠皮膚肥大細胞 2.組織來源:皮膚組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠皮膚肥大細胞分離自皮膚組織;皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細胞因子,參與免疫調節(T細胞、B細胞、APC細胞活化)。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細胞同樣,具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質,可在組織內引起速發型過敏反應(炎癥)。由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸,使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形,細胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形,細胞質中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠皮膚肥大細胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠皮膚肥大細胞經MCG-35免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R089 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態圓形 傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 S100A11 基因全長ORF克隆
大鼠 IL24 基因全長ORF克隆
大鼠 IL22 基因全長ORF克隆
大鼠 IL17F 基因全長ORF克隆
大鼠 IL17A 基因全長ORF克隆
大鼠 IL13 基因全長ORF克隆
大鼠 IL9 基因全長ORF克隆
大鼠 IL5 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC10A2 基因全長ORF克隆
大鼠 ITGB7 基因全長ORF克隆
大鼠皮膚肥大細胞M17瓊脂 英文名稱:M17 Agar 產品規格:250g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Gastricsin
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor A
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Muellerian-inhibiting factor
0.312-20 ng/mL 人/蘇蛋白PP1-α催化亞基(PP-1A)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL B1(Vitamin B1)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人類γ(Tryptase gamma)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人腦特異性蛋白4(PRSS22)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Adiponectin receptor protein 1
0.156-10 ng/ml 豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)